Буккальный соскоб герпес 6 типа

Буккальный соскоб герпес 6 типа thumbnail

Цитомегаловирус, Вирус Эпштейна-Барр, Вирус герпеса 6 типа, качественный — определение ДНК цитомегаловируса, Вируса Эпштейна-Барр, Вируса герпеса 6 типа в соскобе урогенитального тракта, методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».

Метод ПЦР — позволяет идентифицировать в биологическом материале искомый участок генетического материала и обнаружить единичные молекулы ДНК вируса, не выявляемые другими методами. Принцип метода основан на многократном увеличении числа копий, специфичных для данного возбудителя участка ДНК.

С помощью ПЦР-анализа можно диагностировать инфекцию в остром периоде и выявлять случаи носительства.

Цитомегаловирус (ЦМВ) — это разновидность из группы герпесвирусов (Herpesvirus), относящаяся к роду Cytomegalovirus подсемейства 3-herpesviridae. Встречается везде. Статистика частоты встречаемости очень вариативна — вероятно, из-за того, что у значительной массы носителей вируса заболевание протекает бессимптомно. Способов полного излечения от герпеса пока нет, т.е. зараженный человек остается носителем возбудителя на всю жизнь.

ЦМВ — это инфекция, сходная с герпесом или ветрянкой, только с гораздо более серьезными и неожиданными последствиями — от повреждения внутренних органов до необратимых изменений ЦНС. Передача вируса возможна только от человека к человеку — через предметы или животных заражение произойти не может. Определить данное заболевание на ранних стадиях проблематично, его точный инкубационный период пока неизвестен. Проявления инфекции могут быть приняты за воспаление органов мочеполовой системы, обычные недомогания типа ОРВИ (острая респираторная вирусная инфекция) и прочие обычные болезни. Весьма часто ЦМВ приводит к возникновению многочисленных воспалений сразу в нескольких внутренних органах.

Наиболее часто цитомегаловирусная инфекция проявляется как острая респираторно-вирусная инфекция. От больных поступают жалобы на общее недомогание, насморк, быструю утомляемость. Происходит увеличение и воспаление слюнных желез, сопровождающееся беловатым налётом на языке и дёснах, а также обильным выделением слюны.

При генерализованной форме ЦМВ-инфекции наблюдается поражение паренхиматозных (внутренних) органов. Воспаляются почки, поджелудочная железа, печёночная ткань, селезёнка, надпочечники. Это сопровождается «беспричинными», на первый взгляд, бронхитами и пневмониями, которые плохо поддаются лечению антибиотиками. У больных снижается иммунный статус, в периферической крови становится меньше тромбоцитов. Довольно часто наблюдаются поражения стенок кишечника, периферических нервов, сосудов глаз и головного мозга. Увеличиваются подчелюстные и околоушные слюнные железы, воспаляются суставы. Могут появиться высыпания на коже.

У женщин и мужчин поражение мочеполовой системы даёт симптомы хронического неспецифического воспаления. В этом случае, если не обнаружена вирусная природа патологии, лечение заболевания при помощи антибиотиков будет малоэффективно.

Самые серьёзные и опасные осложнения цитомегаловируса — это патология беременности, плода и новорожденного. Если произошло инфицирование плода во время беременности, то риск развития этой патологии будет максимальным. Однако, не стоит забывать, что проблемы могут возникнуть также у беременных при активации латентной ЦМВ-ифекции, когда вирус попадает в кровь, впоследствии заражая плод. Согласно статистике, ЦМВ является наиболее частой причиной невынашивания беременности. Внутриутробная цитомегаловирусная инфекция является причиной поражений центральной нервной системы (тугоухость и отставание в умственном развитии). 20–30% случаев заканчиваются смертью ребёнка.

При беременности вирус не всегда передается от больной матери ребенку. Но если инфицирование ЦМВ произошло в период беременности или болезнь усилилась, то вероятность передачи заболевания плоду значительно возрастает.

Возникший иммунодефицит может спровоцировать активизацию болезни. Возбудитель может содержать моча, слюнная или семенная жидкость, молоко или секрет шейки матки. Мать может заразить ребенка как внутриутробно, так и при родах или при кормлении. Подростки часто заражаются при поцелуях, половых контактах и т.д.

Передача возбудителя возможна посредством цельной крови или её препаратов, содержащих красные кровяные тельца, либо во время пересадки органов. При нормальном иммунитете заболевание может никак себя не проявлять даже в течение всей жизни.

Вирус Эпштейна-Барр
Вирус Эпштейна-Барр относится к вирусам герпеса организма 4-й группы, который поражает В-лимфоциты человека, вызывая инфекционный мононуклеоз. Кроме того, он связан с развитием волосистой лейкоплакии, назофарингеальной карциномы, лимфомы Беркитта, болезни Ходжкина, В-клеточной лимфомы. Этот вирус может быть причиной так называемого «синдрома хронической усталости».

Первичное инфицирование часто протекает с умеренно выраженным тонзиллитом и фарингитом или бессимптомно. Клинические проявления инфекционного мононуклеоза определяются у 35–50% инфицированных.

Длительность инкубационного периода заболевания составляет 4–6 недель. В начальный период болезни инфекция проявляется болями в мышцах, утомляемостью, общим недомоганием. Затем к ним присоединяется лихорадка, боль в горле, увеличение лимфатических узлов, селезёнки и иногда печени. В некоторых случаях появляется сыпь на руках и туловище. Симптомы сохраняются 2–4 недели.

Для беременных женщин и плода вирус Эпштейна-Барр безопасен. У грудничков, детей младшего возраста мононуклеоз развивается редко.

Вирус герпеса 6-го типа (HHV-6)
Вирус герпеса 6-го типа является одним из 8 герпесвирусов, для которых человек является или единственным, или основным носителем. HHV-6 — это ДНК-вирус подсемейства Betaherpesvirinae рода Roseolovirus, имеет два подтипа — А и B. Более распространён подтип В, однако подтип А чаще всего выявляют у пациентов с иммунодефицитами.

Полное самовоспроизведение вируса происходит только в Т-лимфоцитах, но HHV-6 может быть выявлен и в других клетках — моноцитах, В-лимфоцитах, а также в ткани мозга, печени, слюнных желез, в эндотелии.

Основной путь заражения — воздушно-капельный, со слюной. Не исключены случаи передачи вируса герпеса 6 типа от матери ребёнку при кормлении грудью или непосредственно во время родов. У 2% рожениц вирус герпеса присутствует в вагинальном секрете, а ещё у 1% — в крови в пуповине. Неудивительно, что при родах герпес легко может попасть в организм ребёнка через микротравмы и царапины.

Также существует возможность инфицирования при трансплантации органов, гемотрансфузиях, через медицинские инструменты. Наркоманы и медицинские работники могут заразиться при случайном уколе иглой шприца, содержащего кровь больного, либо инфицированного.

Наиболее часто герпесом 6 типа заболевают дети в возрасте от 7 до 24 месяцев. Клиническим проявлением заболевания, вызываемого вирусом герпеса 6-го типа, являются обширные мелкие высыпания на коже у ребёнка, которые часто именуют детской розеолой, шестой болезнью или псевдокраснухой. По всему телу ребёнка распространяются небольшие высыпания, немного приподнятые над кожей и обычно не вызывающие зуда, быстро развивающаяся сильная лихорадка, продолжающаяся 3–4 дня. Часто болезнь протекает бессимптомно, сходство внезапной экзантемы с симптомами кори или краснухи зачастую приводит к постановке ошибочного диагноза.

В некоторых случаях бывают осложнения со стороны центральной нервной системы (судороги на фоне высокой температуры, редко энцефалит, менингоэнцефалит, серозный менингит).

Взрослые редко инфицируются ВГЧ-6, причём заражение у них может сопровождаться симптомами инфекционного мононуклеоза (вирус Эпштейна-Барр в таком случае отсутствует) или фульминантного гепатита.

ВГЧ-6 способен вызвать отторжение трансплантата у реципиентов. Осложнения вследствие активации ВГЧ-6 отмечены у пациентов после пересадки костного мозга, почек, печени, лёгких. В частности, пациенты после трансплантации костного мозга часто страдают от заболеваний, обусловленных HHV-6 (интерстициальная пневмония, супрессия костного мозга, менингоэнцефалит). Активация ВГЧ-6 является причиной 80 % случаев идиопатической лейкопении после трансплантации печени. К счастью, при своевременной диагностике ВГЧ-6 поддаётся лечению с помощью лекарственных препаратов.

ВИЧ-инфицированные составляют ещё одну категорию лиц с иммунодефицитом, у которых активация ВГЧ-6 способна приводить к серьёзным осложнениям (к поражениям ЦНС, к пневмонии и пр.) и прогрессированию основного заболевания. Кроме того, активный ВГЧ-6 может способствовать переходу ВИЧ из латентной в активную форму, поэтому регулярный контроль активности ВГЧ-6 у ВИЧ-положительных пациентов важен для своевременного начала антивирусной терапии.

Герпесвирус HHV-6 вызывает такие заболевания, как рассеянный склероз, энцефалит, розовый лишай, лихорадка у детей с судорожным синдромом, инфекционный мононуклеоз, синдром хронической усталости, аутоиммунный тиреоидит, ретробульбарный неврит, печёночная недостаточность, рак. Существуют данные о том, что ВГЧ-6 является кофактором СПИДа, некоторых форм карцином шейки матки и назофарингеальных карцином.

Показания:

  • для подтверждения наличия/отсутствия инфекции;
  • для того, чтобы определить характер течения инфекции;
  • для дифференциальной диагностики инфекций;
  • профилактические скрининговые исследования;
  • подготовка к беременности;
  • признаки внутриутробной инфекции, фетоплацентарная недостаточность;
  • гепато-спленомегалия неясной природы;
  • лихорадка неясной этиологии;
  • повышение уровня печёночных трансаминаз, гамма-ГТ, ЩФ в отсутствие маркёров вирусных гепатитов;
  • невынашивание беременности (замершая беременность, привычные выкидыши).

Подготовка
За месяц до сдачи исследования необходимо исключить прием антибиотиков.

Мужчины:

  • соскоб уретры. Рекомендуется сдавать через 2 часа после последнего мочеиспускания;
  • первая порция свободно выпущенной мочи.

Женщины:

  • соскоб уретры, цервикального канала, влагалища. Сдача соскоба не допускается в дни менструации. За трое суток до взятия необходимо отказаться от применения вагинальных свечей, тампонов, спермицидов, за сутки — исключить половые контакты. Нельзя спринцеваться накануне проведения обследования. После УЗИ-исследования с применением вагинального датчика, кольпоскопии, биопсии — должно пройти не менее 48 часов. 

Слюна
Слюна собирается в стерильный контейнер. Желательно собирать биоматериал утром. Перед сбором нельзя чистить зубы, с момента последнего приема пищи должно пройти минимум 4 часа.

Моча
Накануне сдачи анализа не рекомендуется употреблять в пищу овощи и фрукты, которые могут изменить цвет мочи (свекла, морковь, клюква и т.п.), принимать диуретики.

Перед сбором мочи необходимо провести тщательный гигиенический туалет внешних половых органов. Собирают строго утреннюю порцию мочи, выделенную сразу же после сна. Женщинам не рекомендуется сдавать анализ мочи во время менструации; во избежание попадания в мочу выделений из влагалища. Рекомендуется ввести во влагалище тампон.

За сутки до сдачи исключить прием алкоголя и половой акт.

Материал собирается в стерильный пластиковый контейнер. Собирается первая порция утренней мочи. При первом утреннем мочеиспускании небольшое количество мочи (первые 1–2 сек) выпустить в унитаз, а затем, не прерывая мочеиспускания, собрать первую порцию мочи в чистую емкость. Продолжить мочеиспускание в унитаз. Емкость закрыть, промаркировать.

Интерпретация результата
Ответ выдается в качественном формате: «обнаружено» или «не обнаружено».

 «Обнаружено»:

  • в анализируемом образце обнаружен специфичный для Цитомегаловируса, вируса Эпштейна-Барр, вируса герпеса 6 типа фрагмент ДНК. 

«Не обнаружено»:

  • в анализируемом образце не обнаружен специфичный для Цитомегаловируса, вируса Эпштейна-Барр, вирус герпеса 6 типа фрагмент ДНК или концентрация возбудителя в образце ниже границы чувствительности теста.

Источник

У 15% детей раннего возраста, поступающих на стационарное лечение, протекает инфекция, вызванная вирусом герпеса шестого типа.

Так как вирусная инфекция, а именно розеола, шестая болезнь или внезапная детская экзантема, осложняется судорогами, своевременный анализ на герпес 6 типа становится важным с точки зрения предупреждения последующих осложнений.

Полноценные терапевтические мероприятия позволяют предотвратить повтор судорог, а также энцефалит.

Вирус считается одним из провоцирующих факторов синдрома хронической усталости, поэтому анализ крови на герпес 6 типа актуален и для диагностики расстройств функций высшей нервной деятельности у взрослых, а также в комплексном выявлении причины гепатита, миокардита, тромбоцитопенической пурпуры, эозинофилии, синдрома гиперчувствительности к медицинским препаратам.

Где можно обнаружить вирус герпеса 6 типа

Буккальный соскоб герпес 6 типафото розеола у ребенка

Детская внезапная экзантема или розеола, инициированная герпесом 6 типа, повсеместно и широко распространена среди младенцев и детей раннего возраста.

Актуальность инфекции обусловлена отсутствием стандартных решений лечения, тяжестью осложнений. Кроме того, клиника розеолы на начальных этапах заболевания не имеет четких специфических симптомов, а патогномоничный признак – сыпь на фоне снижения высокой температуры – появляется в конце заболевания, когда диагностика не совсем актуальна.

Розеола является проявлением первичного заражения вирусом герпеса 6 типа и максимально проявляется в раннем детстве. Помимо классического течения в виде стойкой лихорадки и высыпаний, внезапная экзантема способна протекать практически бессимптомно.

Важно!

Как и другие виды герпеса, шестой тип после первичного инфицирования и заболевания вступает в фазу латенции (бессимптомного носительства) и пожизненно сохраняется в организме человека.

Повторная активация вируса чаще характерна для лиц с иммунодефицитом и выражается в форме пневмонии, гепатита, воспаления сердечной мышцы, энцефалита, отторжении пересаженного органа или ткани.

Следует отметить, что ДНК вируса герпеса 6 типа имеет структурное сходство с третьим типом (цитомегаловирусом), поэтому их относят к одной подгруппе бета. Шестой вирус делится на 2 подтипа: А и В.

Последний вызывает розеолу, воспаление головного мозга и судорожный синдром фебрильного типа, чем и опасен для маленьких детей. В свою очередь, подтип А обуславливает синдром хронической усталости, иммунодефицит, прогрессирование ВИЧ, рассеянный склероз.

Носительство герпеса 6 типа регистрируется у 90% населения планеты, что обусловлено легкостью его передачи между людьми посредством слюны.

Но при этом результат анализа на 6 тип герпеса в слюне может быть ложноположительным, так как перекрестно реагирует с ВГЧ 7 разновидности.

Помимо слюны, резервуаром возбудителя служат и небные миндалины. ДНК ВГЧ 6 типа пожизненно находится в моноцитах крови.

Большинство женщин в стадии максимальной фертильности инфицированы вирусом, поэтому некоторые из них могут стать источником инфекции для развивающегося в утробе ребенка.

У 2% беременных вирус обнаруживается в отделяемом влагалища, а у 40% — определяется ДНК в крови.

При выкидыше, гепатитах новорожденного, гидроцефалии у плода вирус герпеса 6 типа подозревают как потенциальную причину.

Внутриутробное инфицирование данным патогеном встречается с частотой не более 1% в популяции.

Более 90% случаев розеолы отмечается в возрасте до 2 лет. При этом максимальные уровни регистрируют от 7 до 14 месяцев.

Ребенок при рождении имеет определенный уровень anti HHV 6 типа IgG, но к 4 месяцу жизни уровень иммуноглобулинов падает, и младенец становится все более уязвим к инфекции.

Клиническая диагностика розеолы

Буккальный соскоб герпес 6 типафото розеола у детей

Заболевание у детей подозревают при следующих характерных признаках:

  • высокая температура тела (поднимается резко), которая удерживается 4-5 дней на значениях 39-40°С и выше, эффект от жаропонижающих несущественный;
  • на фоне температуры могут не отмечаться такие симптомы, как заложенность носа, кашель, но присутствует покраснение горла (входные ворота для инфекции);
  • у маленьких детей обычно сохраняются аппетит и активность, несмотря на высокую температуру;
  • при снижении температуры на коже появляется сыпь в форме папул и пятен красного или розового цвета, не сливающихся между собой, покрывающих в начале только туловище, а затем шею, лицо, руки и ноги. Также могут встречаться и мелкие пузырьки. Проходит сыпь за 1-3 дня самостоятельно;
  • для герпеса 6 типа характерно появление судорожного синдрома на фоне высокой температуры в начале заболевания.

Зачастую ребенку на при высокой температуре выставляют диагноз «ОРВИ», не предлагая сдать анализ крови на вирус герпеса 6 типа. Знать вид инфекции важно в том случае, когда при лихорадке появились судороги.

Это необходимо для исключения постановки «лишних» неврологических диагнозов ребенку, а также проявления настороженности на ближайшие дни заболевания.

Если судороги повторяются, возрастает вероятность эпилепсии, поэтому терапия должна быть направлена на профилактику их повторения.

Помимо традиционного течения болезни, достаточно часто регистрируются случаи температуры без сыпи.

Анализы на ВГЧ 6 типа и расшифровка

Буккальный соскоб герпес 6 типаПосле оценки симптоматики у больного приступают к лабораторной диагностике вирусной инфекции. Для верификации диагноза используют анализы:

  • серологическая диагностика — кровь на антитела к герпесвирусу человека 6 типа IgG и IgМ;
  • ПЦР на герпес 6 типа в слюне, крови и другом материале;
  • общий клинический анализ крови.

Анализ крови на антитела

Для выявления иммуноглобулинов к ВГЧ 6 типа сдают кровь из вены с целью выполнения ИФА.

Важно!

Определить антитела IgМ (маркеры острой первичной инфекции) можно на 5-7 день заболевания.

Максимальный уровень иммуноглобулинов М отмечается на 2-3 неделе болезни. Через 2 месяца эти антитела не обнаруживаются в анализе крови. Антитела М к герпесвирусу человека 6 типа не будут обнаружены при реактивации инфекционного процесса. Данный факт отличает данную вирусную инфекцию от многих заболеваний.

Анализ на Human herpes virus 6 IgG положительный становится на 7-11 день болезни с максимумом на третьей неделе. В отличие от IgМ сохраняются IgG всю жизнь.

Следует иметь в виду, что, начиная с 2 лет 90% людей будут иметь положительный анализ на ВГЧ 6 типа, поэтому для диагностики заболевания в данный момент времени необходимо сдавать кровь 2 раза с интервалом в 14 дней (на основании первого положительного результата диагноз не выставляют).

Anti HHV 6 типа IgG положительные при остром процессе у ранее инфицированного индивидуума будут при первой сдаче крови, а во втором результате количество антител возрастет. Если первый анализ отрицательный, то второй при этой инфекции станет положительным.

Если пациент проходит диагностику синдрома хронической усталости или иных болезней и анализ на Human Herpes virus 6 IgG положительный, следует провести дифференциацию подтипов А и В с помощью моноклональных и поликлональных антител.

ПЦР

Буккальный соскоб герпес 6 типаОпределение генетического материала вируса в слюне, крови и других биологических жидкостях проводится с помощью ПЦР.

Этот анализ подразумевает качественную и количественную диагностику. В первом случае определяют наличие ДНК, во втором – число копий вирусной частицы (вирусную нагрузку).

Если анализ на ДНК Human herpesvirus 6 (HHV 6) по качественным показателям положительный – диагноз подтвержден, что означает присутствие в материале вируса. Но данный результат может подтверждать, как бессимптомное носительство, так и заболевание.

Количественное определение ДНК необходимо для анализа эффективности выполняемого лечения.

Общий анализ крови

Для внезапной детской экзантемы или розеолы у детей характерны некоторые изменения в крови: снижение уровня лейкоцитов на пике заболевания, снижение количества нейтрофилов, тромбоцитов, а также в некоторых случаях небольшое количество атипичных мононуклеаров (не более 10%).

Если клиника инфекции типичная, но анализы не показывают наличия ВГЧ 6 типа, проводят исследования на предмет вируса герпеса 7 типа, энтеровируса. Сыпь довольно часто путают с краснушной или аллергической, что ведет к ложным результатам.

Автор: врач-инфекционист Куликовская Наталья Александровна

Полезное видео

Вконтакте

Facebook

Twitter

Google+

Одноклассники

Источник