Хеликс пцр герпес 6 типа
Исследование для выявления возбудителя герпес-вирусной инфекции 6-го типа (Human Herpes Virus 6), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется генетический материал (ДНК) вируса в образце биоматериала.
Синонимы русские
Герпес-вирус 6-го типа, ВГЧ-6, РТ-ПЦР.
Синонимы английские
HHV-6, DNA [Real-time PCR].
Метод исследования
Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Биоптат, венозную кровь, ликвор, мазок из зева (ротоглотки), слюну.
Общая информация об исследовании
6-й тип герпес-вируса человека (ВГЧ-6) впервые был определен относительно недавно, в 1986 г., в крови ВИЧ-инфицированных пациентов. К настоящему времени установлено, что инфекция ВГЧ-6 широко распространена и имеет 2 подтипа, отличающихся генетически, – А и В. В целом более распространен подтип В, однако подтип А чаще обнаруживают у пациентов с иммунодефицитами.
Полная репликация вируса происходит только в Т-лимфоцитах, но ВГЧ-6 может быть выявлен и в других клетках – моноцитах, В-лимфоцитах, а также в ткани мозга, печени, слюнных желез, в эндотелии.
Наиболее вероятный путь заражения – воздушно-капельный, со слюной, не исключена передача инфекции от матери к ребенку во время беременности.
Также существует возможность инфицирования при трансплантации органов, гемотрансфузиях, через медицинские инструменты. Наркоманы и медицинские работники могут заразиться при случайном уколе иглой шприца, содержащего кровь больного либо инфицированного.
Первый раз заражение практически всегда происходит в возрасте от 4 до 24 месяцев. В большинстве случаев ВГЧ-6 протекает бессимптомно, а если проявляется, то чаще всего как внезапная экзантема и быстро развивающаяся сильная лихорадка, продолжающаяся 3-4 дня. Через несколько часов после нормализации температуры появляются эритематозные пятна или пятнисто-папулезная сыпь. Сходство внезапной экзантемы с симптомами кори или краснухи зачастую приводит к постановке ошибочного диагноза.
В некоторых случаях бывают осложнения со стороны центральной нервной системы (судороги на фоне высокой температуры, редко энцефалит, менингоэнцефалит, серозный менингит).
Взрослые редко инфицируются ВГЧ-6, причем заражение у них может сопровождаться симптомами инфекционного мононуклеоза (вирус Эпштейна – Барр в таком случае отсутствует) или фульминантного гепатита.
ВГЧ-6 способен вызвать отторжение трансплантата у реципиентов. Осложнения вследствие активации ВГЧ-6 отмечены у пациентов после пересадки костного мозга, почек, печени, легких. В частности, пациенты после трансплантации костного мозга часто страдают от заболеваний, обусловленных HHV-6 (интерстициальная пневмония, супрессия костного мозга, менингоэнцефалит). Активация ВГЧ-6 является причиной 80 % случаев идиопатической лейкопении после трансплантации печени. К счастью, при своевременной диагностике ВГЧ-6 поддается лечению с помощью лекарственных препаратов.
ВИЧ-инфицированные составляют еще одну категорию лиц с иммунодефицитом, у которых активация ВГЧ-6 способна приводить к серьезным осложнениям (к поражениям ЦНС, к пневмонии и пр.) и прогрессированию основного заболевания. Кроме того, активный ВГЧ-6 может способствовать переходу ВИЧ из латентной в активную форму, поэтому регулярный контроль активности ВГЧ-6 у ВИЧ-положительных пациентов важен для своевременного начала антивирусной терапии.
Сегодня активно исследуется возможная роль ВГЧ-6 в развитии рассеянного склероза, синдрома хронической усталости, лимфопролиферативных заболеваний.
Так как ВГЧ-6 в латентной форме распространен практически повсеместно, очень важно вовремя устанавливать характер его течения – активный/неактивный. Активация любой вирусной инфекции начинается с размножения (репликации) вируса в клетке-хозяине. Далее в большинстве случаев клетки-хозяева погибают, а новые вирусы выходят в межклеточное пространство (внутритканевую жидкость) для заражения новых клеток. Оттуда вирусные частицы попадают в различные биологические жидкости (кровь, мочу, ликвор) и железистые секреты, где могут быть легко обнаружены с помощью ПЦР. Выявление вирусных ДНК/РНК в бесклеточных образцах биологических жидкостей или железистых секретах является однозначным указанием на активную вирусную инфекцию. Однако диагностика инфекции осложняется тем, что ВГЧ-6 после репликации в клетке-хозяине заражает другие клетки напрямую, проникая через межклеточные перегородки и избегая межклеточных пространств. Таким образом, подтверждение активности ВГЧ-6 посредством ПЦР в бесклеточных образцах биологических жидкостей и секретах удается не во всех случаях. В связи с этим возникает необходимость подтверждения активности/неактивности ВГЧ-6 с помощью серологических методов.
Когда назначается исследование?
- При дифференциальной диагностике детских инфекций, протекающих с высокой температурой и сыпью.
- При диагностике инфекционного мононуклеоза при отрицательном тесте на вирус Эпштейна – Барр.
- В комплексе обследований пациентов с лимфопролиферативными заболеваниями и гемобластозами.
- При обследовании реципиентов органов и тканей до и после трансплантации.
- При диагностике вирус-ассоциированных заболеваний у ВИЧ-инфицированных и при других иммунодефицитных состояниях (например, синдроме хронической усталости).
- При контроле за эффективностью проведенного антивирусного лечения.
Для чего используется исследование?
- Для подтверждения наличия/отсутствия инфекции.
- Для того чтобы определить характер течения инфекции – активный/неактивный.
- Для дифференциальной диагностики герпетических инфекций.
Что означают результаты?
Референсные значения
Результат: отрицательный.
Причины положительного результата
- Однократный положительный результат реал-тайм ПЦР однозначно свидетельствует об активной ВГЧ-6 инфекции.
Причины отрицательного результата
- Однократный отрицательный результат реал-тайм ПЦР может быть признаком отсутствия активной ВГЧ-6-инфекции и нуждается в дополнительном подтверждении с помощью ретроспективных исследований вирусоспецифических IgG-антител.
Что может влиять на результат?
Свойство ВГЧ-6 поражать другие клетки напрямую, не выходя за их пределы, способствует ложноотрицательному результату.
Важные замечания
- Лимфоциты и моноциты крови являются местом постоянного обитания и размножения ВГЧ-6 у инфицированных людей, поэтому надежным свидетельством активации/реактивации ВГЧ-6 служит обнаружение ДНК ВГЧ-6 в бесклеточных производных крови – сыворотке или бесклеточной плазме.
Также рекомендуется
- Human Herpes Virus 6, IgG
Кто назначает исследование?
Аллерголог-иммунолог, акушер, гинеколог, инфекционист, педиатр, невролог, гематолог, хирург.
Литература
- Nolan T, Hands RE, Bustin SA (2006). «Quantification of mRNA using real-time RT-PCR.». Nat. Protoc. 1: 1559-1582.
- VanGuilder HD, Vrana KE, Freeman WM (2008). «Twenty-five years of quantitative PCR for gene expression analysis». Biotechniques 44: 619–626.
- Salahuddin S.Z., Albashi D.V.,Markham P.D., et.al., (1986) Isolation of a new virus, HBLB, in patient with lymphoproliferative disorders. Science 234:596-601.
- Asano Y., Yoshikawa T., Kajita Y et al.(1992) Fatal encephalitis/encephalopathy in primary human herpesvirus-6 infection. Arch. Dis. Child. 67:1484-1485.
- Zhen Z, J Virol. 2005 Sep;79(18):11914-24.The human herpesvirus 6 G protein-coupled receptor homolog U51 positively regulates virus replication and enhances cell-cell fusion in vitro.
- Gautheret-Dejean, A J Virol Methods. 2002 Feb;100(1-2):27-35. Development of a real-time polymerase chain reaction assay for the diagnosis of human herpesvirus-6 infection and application to bone marrow transplant patients.
- Krueger GR, Ablashi DV, Josephs SF, Salahuddin SZ, Lembke U, Ramon A, Bertram G.Clinical indications and diagnostic techniques of human herpesvirus-6 (HHV-6) infection.n Vivo. 1991 May-Jun;5(3):287-95.
- Yamanishi K., Okuno T., Shiraki K., et al. (1988) Identification of human herpesvirus-6 as casual agent for exanthem subitum. Lancet 1:1065-1067.
- Preziozo P.J., Cangiarella J., Lee M., et al. (1992) Fatal disseminated infection with humanherpesvirus-6. J.Pediatrics 120:921-923.
Источник
Комплексное исследование, направленное на обнаружение генетического материала (ДНК) цитомегаловируса, вирус Эпштейна – Барр, вируса герпеса человека 6-го типа методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени.
Синонимы русские
Цитомегаловирус; ЦМВ; вирус Эпштейна – Барр; ЭБВ; герпес-вирус 6-го типа; ВГЧ-6; ДНК [полимеразная цепная реакция в режиме реального времени]; количественный анализ.
Синонимы английские
Cytomegalovirus; CMV; Epstein Barr-Virus; EBV; Human Herpes Virus 6; HHV-6; DNA [polymerase chain reaction, real-time PCR]; quantitative; qRT-PCR.
Метод исследования
Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Ликвор, мазок из зева (ротоглотки), слюна, биоптат (биоптат лёгких, печени, ЖКТ), венозная кровь.
Общая информация об исследовании
Цитомегаловирус, вирус Эпштейна – Барр, вирус герпеса человека 6-го типа являются представителями семейства герпес-вирусов. Они обладают высокой патогенностью для человека, имеют способность к длительному латентному существованию, к персистенции в организме человека и могут вызывать заболевания с различными клиническими проявлениями.
Цитомегаловирус (Cytomegalovirus) относится к семейству герпес-вирусов человека, рода Cytomegalovirus и является возбудителем цитомегаловирусной инфекции. Цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ) – это широко распространенная инфекция человека, характеризующаяся легким, бессимптомным течением у людей в обычных условиях и с нормально функционирующей иммунной системой. Особое клиническое значение она приобретает у лиц с патологией иммунной системы, иммунодефицитными состояниями и у беременных женщин из-за риска внутриутробного инфицирования плода.
Цитомегаловирус является ДНК-содержащим вирусом, обладающим способностью к медленному распространению в культуре инфицированных клеток и приводящим к их изменению и увеличению размера (цитомегалии). Источником инфекции является человек, выделяющий вирус через различные биологические жидкости. К ним относятся кровь, слюна, моча, грудное молоко, цервикальный и вагинальный секрет, семенная жидкость, ликвор, содержимое желудочно-кишечного тракта и прочие секреты. Инфекция передается воздушно-капельным, контактным, половым путем, в результате переливания крови от инфицированного донора. Возможно также заражение при трансплантации органов и вертикальный путь передачи, от инфицированной женщины к ребенку во время беременности или родов. Длительность инкубационного периода заболевания часто установить невозможно, так как большинство клинических случаев не распознается и протекает в латентной, бессимптомной, форме.
Различают приобретенную и врождённую формы ЦМВИ. Приобретенная форма инфекции протекает в виде острого локализованного процесса, схожего по клинической симптоматике с острой респираторной вирусной инфекцией или инфекционным мононуклеозом. Отмечается повышение температуры тела, слабость, общее недомогание, боль в горле, миалгия, увеличение шейных лимфатических узлов. В редких случаях отмечаются осложнения в виде артралгий, артритов, пневмонии, цитомегаловирусного гепатита. У детей до трех месяцев жизни, а также у лиц с патологией иммунной системы (иммунодефицитными состояниями, ВИЧ-инфекцией, после трансплантации органов, лечения иммуносупрессивными препаратами, при злокачественных заболеваниях) ЦМВИ может протекать в тяжелой форме с развитием серьезных осложнений. При этом развиваются тяжелые поражения легких, почек, печени, желудочно-кишечного тракта, нервной системы с развитием вирусного энцефалита. Врождённая форма ЦМВИ возникает в результате трансплацентарной передачи инфекции от матери плоду при инфицировании женщины на ранних сроках беременности, особенно при первичном инфицировании. Развивается острая врождённая ЦМВИ, приводящая к самопроизвольному аборту или гибели эмбриона. При поражении плода на более поздних сроках беременности развивается геморрагический синдром с кровоизлияниями в кожу, внутренние органы, отмечается поражение нервной системы.
Вирус Эпштейна – Барр (EBV) относится к семейству герпес-вирусов (Herpesviridae) человека 4-й группы. Он представляет собой ДНК-содержащий лимфопролиферативный вирус. Его основной особенностью является способность реплицироваться преимущественно в В-лимфоцитах без последующего разрушения клеток.Помимо этого, вирус может инфицировать Т-лимфоциты и эпителиальные клетки.
Источником инфекции является больной человек или вирусоноситель. Путь передачи вируса – преимущественно воздушно-капельный. У 90-95 % населения некоторых стран выявляются антитела к антигенам вируса, что свидетельствует о предшествующем инфицировании вирусом. Острая инфекция обычно протекает бессимптомно у детей с нормально функционирующей иммунной системой, клинически проявляясь в виде инфекционного мононуклеоза у 30-50 % иммунокомпетентных подростков и взрослых. При патологиях иммунной системы, иммунодефицитных состояниях, при применении иммуносупрессивных препаратов возможно развитие разнообразных патологических процессов и заболеваний, вызванных вирусом Эпштейна – Барр. У таких больных присутствие вируса ассоциировано с развитием различных лимфопролиферативных нарушений и некоторых онкологических процессов, включающих лимфому Беркитта, назофарингеальную карциному, лимфогранулематоз (болезнь Ходжкина), В-клеточную лимфому. Также вирус обнаруживается у пациентов при некоторых аутоиммунных заболеваниях, синдроме хронической усталости.
Инфекционный мононуклеоз – это острое вирусное заболевание, причиной которого является вирус Эпштейна – Барр. В основном заболевание регистрируется у детей и лиц молодого возраста до 35 лет. Инкубационный период заболевания составляет в среднем 5-14 дней, иногда до 30 дней. К клиническим проявлениям заболевания относятся лихорадка, головная боль, поражение зева, нёбных, глоточных миндалин, лимфатических узлов (лимфоаденопатия), увеличение печени и селезенки. Заболевание может протекать в легкой, средней тяжести и тяжелой форме. К осложнениям инфекционного мононуклеоза относятся отиты, синуситы, паратонзиллиты, пневмонии, гепатиты. Редко могут встречаться разрывы селезенки, острая печеночная недостаточность, острая гемолитическая анемия, тромбоцитопения, миокардит, неврит, менингит, менингоэнцефалит. В редких случаях развивается хроническая активная инфекция, при которой симптомы заболевания сохраняются на протяжении более чем 6 месяцев после первичного инфицирования вирусом Эпштейна – Барр.
Вирус герпеса человека типа 6 (ВГЧ-6) представляет собой ДНК-содержащий вирус, относящийся к семейству герпес-вирусов человека. Он способен к репликации в Т-лимфоцитах, но может быть обнаружен в В-лимфоцитах, моноцитах, эндотелиальных клетках, гепатоцитах и ряде других. Источником инфекции является больной человек или вирусоноситель. Путь передачи вируса преимущественно воздушно-капельный. Возможна передача вируса вертикальным путем от матери к плоду во время беременности, при гемотрансфузиях, во время операций и при трансплантации органов.
Вирус способен проникать в лимфатическую систему и вызывать заболевания с разнообразной клинической симптоматикой. Чаще всего патологический процесс, вызванный ВГЧ-6, развивается у лиц с патологией иммунной системы, иммунодефицитными состояниями, в частности при ВИЧ-инфекции, при применении иммуносупрессивной терапии, после трансплантации органов, при аутоиммунных заболеваниях.
В большинстве случаев инфекция, вызванная ВГЧ-6, протекает бессимптомно. К основным клиническим проявлениям относятся лихорадка, экзантема в виде эритематозных пятен или пятнисто-папулезной сыпи. В некоторых случаях возможно развитие осложнений со стороны центральной нервной системы: судороги, энцефалит, менингоэнцефалит, серозный менингит. У иммунокопрометированных лиц инфекция характеризуется тяжелым течением, генерализацией процесса. Развиваются лимфаденопатии, пневмония, гепатит, энцефалит.
Диагностика вирусной инфекции, вызванной представленными вирусами, является комплексной и основана на оценке клинических проявлений заболеваний и лабораторных методов диагностики. Современные методы лабораторной диагностики играют важную роль в диагностики герпес-вирусных инфекций, особенно на ранних стадиях инфекционного процесса. К таким методам относится метод полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять генетический материал возбудителя на ранних этапах заболевания. Он характеризуется высокими показателями диагностической чувствительности и специфичности, быстротой получения конечного результата и доступностью. Особенностью метода является возможность выявлять ДНК (дезоксирибонуклеиновую кислоту) вируса даже при малом содержании её в исследуемом биологическом материале. Метод основан на многократном увеличении числа копий специфичного для данного возбудителя участка ДНК. Для диагностики может использоваться разнообразный биологический материал, взятый у детей, взрослых лиц, людей с патологией иммунной системы, беременных женщин. Метод позволяет определять количество молекул ДНК исследуемого вируса, что является важным в диагностике острой формы инфекции, реактивации персистентной инфекции, носительстве вируса, а также при контроле эффективности проводимой противовирусной терапии.
Для чего используется исследование?
- Для диагностики и подтверждения инфекционного процесса, вызванного цитомегаловирусом, вирусом Эпштейна – Барр, вирусом герпеса человека 6-го типа.
- Для диагностики острой или текущей вирусной инфекции.
- Для диагностики первичной инфекции и/или активной формы инфекции в период реактивации (обострения) персистентной инфекции.
- Для дифференциальной диагностики инфекций, вызванных герпес-вирусами.
- Для дифференциальной диагностики инфекций, протекающих с развитием ангин, тонзиллитов, высыпаниями, лихорадкой.
Когда назначается исследование?
- При диагностике и дифференциальной диагностике инфекций, вызванных герпес-вирусами.
- При клинических проявлениях заболеваний, вызванных цитомегаловирусом, вирусом Эпштейна – Барр, вирусом герпеса человека 6-го типа, или при их бессимптомном, латентном течении.
- При обследовании женщин, планирующих беременность, и женщин при патологиях имеющейся беременности.
- При комплексном обследовании пациентов с лимфопролиферативными заболеваниями и гемобластозами.
- При обследовании реципиентов органов и тканей до и после трансплантации, при проведении иммуносупрессивной терапии.
- При диагностике вирус-ассоциированных заболеваний у ВИЧ-инфицированных и при других иммунодефицитных состояниях.
- При контроле за эффективностью проведенного лечения противовирусными препаратами.
Что означают результаты?
Референсные значения
ДНК CMV концентрация: не обнаружено.
ДНК EBV концентрация: не обнаружено.
ДНК HHV6 концентрация: не обнаружено.
* При положительном результате показатель выдается в копиях на миллилитр (копий/мл).
Причины положительного результата:
- Инфицирование цитомегаловирусом или носительство вируса.
- Инфицирование вирусом Эпштейна – Барр или носительство вируса.
- Инфицирование вирусом герпеса человека 6-го типа или носительство вируса.
Причины отрицательного результата:
- Отсутствие инфицирования цитомегаловирусом;
- Отсутствие инфицирования вирусом Эпштейна – Барр;
- Отсутствие инфицирования вирусом герпеса человека 6-го типа.
Также рекомендуется
- Cytomegalovirus, ДНК, количественно [реал-тайм ПЦР]
- Epstein Barr Virus, ДНК [реал-тайм ПЦР]
- Human Herpes Virus 6, ДНК [реал-тайм ПЦР]
- Cytomegalovirus предранний белок IEA, IgM, IgG
- Cytomegalovirus, IgG
- Cytomegalovirus, IgM
- Cytomegalovirus, ДНК [реал-тайм ПЦР]
- Антитела к Cytomegalovirus (IgG) с определением авидности
- Human Herpes Virus 6, IgG
- Epstein Barr Virus капсидный белок (VCA), IgM
- Epstein Barr Virus ранние антигены (EA), IgG
- Epstein Barr Virus ядерныйантиген (EBNA), IgG (количественно)
- Epstein Barr Virus капсидный белок (VCA), IgG
- Лабораторная диагностика инфекционного мононуклеоза
- Определение авидности иммуноглобулинов класса IgG к капсидному антигену (VCA) вируса Эпштейна – Барр
Кто назначает исследование?
Терапевт, врач общей практики, инфекционист, аллерголог-иммунолог, акушер-гинеколог, неонатолог, педиатр, уролог, оториноларинголог, гематолог, невропатолог, хирург, онколог.
Литература
- Fauci, Braunwald, Kasper, Hauser, Longo, Jameson, Loscalzo Harrison’s principles of internal medicine, 17th edition, 2009.
- Покровский В.И., Творогова М.Г., Шипулин Г.А. Лабораторная диагностика инфекционных болезней. Справочник / М. : БИНОМ. – 2013.
- Шувалова Е.П. Инфекционные болезни / М.: Медицина. – 2005. – 696 с.
- Wang L, Xu X, Zhang H, Qian J, Zhu J. Dried blood spots PCR assays to screen congenital cytomegalovirus infection: a meta-analysis / Virol J. 2015 Apr 14;12:60.
- VanGuilder HD, Vrana KE, Freeman WM (2008). «Twenty-five years of quantitative PCR for gene expression analysis». Biotechniques 44: 619–626.
Источник