Пцр ликвора на герпес
В последние годы все большее распространение в клинической лабораторной диагностике получает метод полимеразной цепной реакции, основанный на определении нуклеиновых кислот (ДНК или РНК) любых биологических объектов, в том числе, и выявления возбудителей нейроинфекции. Этот метод имеет высочайшую чувствительность в сочетании со специфичностью и возможностью получения результата «в день проведения анализа». С точки зрения клинической значимости, выявление ДНК/РНК равносильно выделению возбудителя. В Диагностическом центре Днепропетровской медакадемии были проведены некоторые исследования ликвора. Цереброспинальная жидкость тестировалась на наличие ДНК: вируса простого герпеса (ВПГ), цитомегаловируса (ЦМВ), вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ), токсоплазмы, микобактерий туберкулеза (МБТ). Из всех проведенных анализов ликвора у 16% была идентифицирована причина нейроинфекции. У 11 новорожденных детей с симптомами внутриутробного поражения центральной нервной системы при исследовании ПЦР-методом диагноз не подтвердился, результаты анализа были негативны. Изучение диагностической значимости показало, что выделение нуклеиновой кислоты в ликворе имеет высокую предсказывающую ценность (99,5%). Ниже в таблице показаны результаты исследования возбудителей менингитов и энцефалитов, которые проводились в диагностическом центре:
Таблица 4 Этиологическая структура идентифицированных возбудителей острых поражений ЦНС
Результат | Наименование возбудителя, n — количество исследований | |||||||||
ВПГ n-43 | ЦМВ n-26 | ВЭБ n-22 | МБТ n-7 | Токс. n-11 | ||||||
абс. | % | абс. | % | абс. | % | абс. | % | абс. | % | |
ДНК выявлена | 4 | 9.3 | 2 | 9 | 2 | 28.5 | ||||
ДНК не выявлена | 39 | 90.7 | 26 | 100 | 20 | 91 | 5 | 71.5 | 11 | 100 |
Метод ПЦР является оптимальным способом экспресс-диагностики этиологии острых инфекций центральной нервной системы, но для повышения эффективности диагностики необходимо проводить тестирование на три и более патогена.
Изменение состава ликвора при различных патологиях.
Спинномозговая жидкость является средой, четко реагирующей на патологические процессы в центральной нервной системе. Глубина и характер ее изменений находятся в связи с глубиной патофизиологических нарушений. Правильная оценка лабораторных ликворологических симптомов позволяет правильно поставить диагноз и оценить эффективность лечения.
Гнойные менингиты
При различных менингитах большая часть наблюдаемых изменений в ликворе являются общими и объединяются в так называемый менингиальный синдром: повышенное давление ликвора, плеоцитоз, положительные белковые реакции, гиперпротеинрахия, гипогликорахия, гипохлоррахия, увеличение иммуноглобулинов и др.
При гнойных менингитах ликвор имеет белесый, мутный или гнойный вид вследствие большого количества клеток. После 1-2ч отстоя образуется грубая фибринозная сетка из-за проникновения фибриногена из плазмы крови.
Плеоцитоз высокий — в пределах 660-1600.106/л клеток. В острой экссудативной фазе преобладают нейтрофильные сегментоядерные гранулоциты с гиперхромными ядрами. В последующем наблюдаются дегенеративные изменения в нейтрофилах: гиперсегментация ядер, пикноз, вакуолизация.
В пролиферативной фазе общее число клеток быстро уменьшается. Появляются активные моноциты, которые превращаются в макрофаги и вначале атакуют бактерии, а затем и гранулоциты. В репаративной фазе гранулоциты исчезают, фагоцитарная активность макрофагов уменьшается. При нормализации числа клеток — преобладают мелкие лимфоциты.
Для диагностики гнойного менингита большое значение имеет исследование ликворного мазка, окрашенного по Грамму для определения бактерий.
Содержание общего белка повышено — 5,0-30,0 г/л. На фореграмме увеличиваются уровни б1-, б2-, г-глобулинов. Активность энзимов повышена. Наиболее характерным является увеличение ЛДГ, АСТ, АЛT, КК-ВВ.
Концентрация глюкозы в ликворе значительно уменьшена, но при переходе процесса от экссудативного в пролиферативный уровень глюкозы повышается. Параллельно с глюкозой желательно исследовать уровень лактата и пирувата, особенно у детей, так как для гнойного менингита характерно значительное повышение лактата. Это позволяет отдифференцировать его от небактериальных менингитов. Большое значение имеет также повышение фосфолипидов и общего холестерола в спинномозговой жидкости.
Туберкулезный менингит
Ликвор при туберкулезном менингите бесцветный и прозрачный, редко ксантохромный и слегка опалесцирующий. Часто образует тонкую фибринозную сетку.
Цитологическое исследование очень важно. Плеоцитоз достигает 100-800. 106/л клеток. В экссудативной фазе преобладают гранулоциты. Но в подострой фазе наблюдается большое разнообразие клеток: встречаются нейтрофилы, макрофаги, плазматические клетки, эозинофилы, трансформированные лимфоциты. Особенно важны изменения лимфоцитов. Наблюдается активирование В- и Т-лимфоцитов еще в начале заболевания. При этом гуморальный иммунный ответ ( В-лимфоциты) продолжается 1-2 мес, тогда как клеточный иммунный ответ (Т-лимфоциты) — 2-3 мес и более. При обострении процесса нейтрофилия нарастает, но при хроническом процессе усиливается лимфоцитоз.
Содержание белка в ликворе повышено. У части больных в хронической фазе наблюдается синдром белково-клеточной диссоциации. Это синдром, характеризующийся повышением концентрации белка в ЦСЖ при незначительном увеличении числа клеток.
Также наблюдается повышение уровней IgA, IgG, IgM, альбумина, трансферрина, церулоплазмина. У некоторых больных выявлено увеличение фибриногена. Содержание преальбумина повышено в острой фазе, но при переходе в хроническую — относительно уменьшается. Активность ферментов ЛДГ, КК, АСТ высокая. Уровень глюкозы в ликворе уменьшается за счет усиленного гликолиза клеток. Но гипогликорахия при туберкулезном менингите не такая глубокая, как при гнойном менингите. Количество лактата и пирувата увеличивается. Уровень общих липидов, фосфолипидов и холестерола также слегка повышен.
Содержание электролитов — в пределах нормы, кроме неорганического фосфора, который слегка увеличивается.
Полиомиелит.
Степень плеоцитоза в ликворе при полиомиелите зависит от стадии заболевания. В препаралитической фазе плеоцитоз умеренный — 50-300. 106/л клеток. В первые 2 недели устанавливается легкая нейтрофилия, а затем — лимфоцитоз. Встречаются также плазматические клетки, моноциты. В первые дни выявляется синдром клеточно-белковой диссоциации. Это синдром, при котором значительно увеличивается плеоцитоз, но незначительно повышается концентрация белка. С начала 2 недели появляется белково-клеточная диссоциация. Белковые реакции Панди и Ноне-Апельта положительные, содержание белка — 0,5-3,0 г/л.
Концентрация АСТ, ЛДГ слегка повышена. Количество глюкозы нормальное. Уровень большей части электролитов в пределах нормы.
Энцефаломиелиты
Энцефаломиелиты — демиелинизирующие заболевания воспалительного типа, которые характеризуются распадом нормально сформировавшегося миелина. Этот процесс сопровождается отчетливым нарушением липидного, белкового, и в меньшей степени, углеводного обмена в мозге, что отражается на составе ликвора. Число клеток обычно нормальное 5-10. 106/л, но при герпетическом энцефалите оно увеличено 50-100. 106/л и преобладают, в основном, сегментоядерные нейтрофилы. Может быть выражена эритроцитрахия.
Концентрация белков обычно незначительно увеличена 0,5-1,0г/л, но может быть в пределах нормы. Протеинограмма показывает увеличение
г- глобулинов и иммуноглобулинов А.
Уровень глюкозы в пределах нормы, но при герпетическом энцефалите может быть слегка уменьшенным. Увеличение содержания нейроспецифической энолазы является индикатором повреждения мозговой паренхимы. Активность энзимов ЛДГ, КК, ЩФ и др нормальная.
Электролиты и показатели кислотно- щелочного состояния в границах нормы.
Источник
Наша клиника уже много лет успешно лечит пациентов с инфекциями нервной, желудочно-кишечной и респираторной системы, урогенитальными инфекциями, инфекциями костей и суставов, а также с ревматическими процессами на фоне инфекций. Мы можем предложить Вам широкий спектр лабораторных исследований на инфекции, в т.ч. – серологическую диагностику (исследование антител к инфекциям).
- Диагностика инфекций с помощью ПЦР. ПЦР – полимеразная цепная реакция
- Микробиологические посевы
- Антитела к инфекциям
- Анализ на стрептококковую инфекцию. Антистрептолизин-О (АСЛО)
- Анализ ликвора на нейроинфекции. Исследование цереброспинальной жидкости на вирусы, бактерии, грибы
- Анализ спермы на вирусы, бактерии, грибы. Исследование секрета простаты и эякулята на вирусы, бактерии, грибы
Диагностика инфекций с помощью ПЦР. ПЦР – полимеразная цепная реакция
ПЦР или полимеразная цепная реакция — это метод исследования, на предмет наличия какой-либо инфекции путем поиска фрагментов ДНК этой инфекции.
Что можно проверить с помощью ПЦР. С помощью ПЦР можно исследовать различный материал: это кровь, кал, отделяемое глаз, носа, пунктат, биоптат, слюна, мазок, внутрисуставная жидкость, цереброспинальная жидкость. Т.е. биоматериалом для ПЦР-исследования может быть практически любая среда организма, где возможно присутствие микробов.
В чем отличие ПЦР от микробиологических посевов. В отличие от бактериологических посевов, ПЦР-исследование менее «капризно» к технологии выполнения. В ряде случаев ПЦР дает больше информации т.к. не каждый микроб растет на искусственных средах хорошо и бактериологические посевы часто получаются ложноотрицательными. Метод ПЦР чувствителен при диагностике туберкулеза, сифилиса, хламидий, микоплазм и других, плохо растущих на питательных средах инфекций.
Для интерпретации результатов ПЦР-исследования мы можем предложить Вам помощь врача-иммунолога, ЛОР врача, уролога, гинеколога, дерматовенеролога, офтальмолога или другого профильного специалиста.
В большинстве случаев, взятие биоматериала для ПЦР исследования производится врачом, но в некоторых случаях медсестрами.
Микробиологические посевы
Что такое микробиологический посев. Микробиологический посев – это исследование, при котором какой-либо биоматериал (кровь, моча, слизь, гной и т.д.) переносится из организма на питательную среду, и если в перенесенном биоматериале есть микробы, то они вырастают в этой среде. В ряде случаев мы совмещаем микробиологические посевы с ПЦР (полимеразная цепная реакция) исследованием, потому что не все микробы хорошо растут на средах, но легко выявляются методом ПЦР, и наоборот, некоторые микробы плохо определяются при ПЦР, но хорошо растут на питательных средах. Для определения вирусных инфекций широко применяется именно ПЦР.
Какие биоматериалы организма можно проверить на питательных средах. В нашей клинике вы можете выполнить посев практически любых биоматериалов: это отделяемое глаза и носа, материал полученный при пункции, слюна, различные мазки, мокрота, кал, моча, кровь, соскобы с кожи, волосы (при наличии инфекции волосяного покрова), ногти и др.
По готовности микробиологического посева может быть определена чувствительность высеянных микробов к различным антибиотикам. После определения чувствительности будет точно ясно, какой препарат будет подходить для лечения. Так же возможно определить чувствительность микробов к бактериофагам, в том случае, когда требуется проведение лечения без применения антимикробных химиопрепаратов.
Антитела к инфекциям
Что такое антитела? Антитела — это специфические белки, которые выделяет иммунная система в ответ на внедрение микроба в организм. Поскольку каждая разновидность грибка, вируса, бактерии, паразита имеют свою уникальную молекулярную антигенную структуру, то иммунная система вырабатывает антитела к каждому антигену каждого микроба. Обычно, в клинической практике, определяется несколько разновидностей антител к микробам (к вирусам, грибкам, бактериям): антитела IgA, IgM и IgG.
Антитела Ig G – эти антитела могут говорить, как о текущей инфекции, если она протекает длительно, так и о перенесенной инфекции. При повышении антител Ig G к любому микробу или вирусу всегда возникает вопрос, это перенесенная или текущая инфекция? На этот вопрос можно ответить с помощью других методов исследования, например, с помощью исследования IgM и IgA, а также с помощью других методов исследований, таких как ПЦР , микробиологический посев и т.д.
Антитела Ig M – это антитела иммунного ответа, которые повышаются при остром воспалении, т.е. при первичном попадании инфекции в организм, либо при обострении хронической инфекции. При обострении хронической инфекции, IgM повышается не всегда, это зависит от типа возбудителя, от давности воспалительного процесса, а также от особенностей иммунной системы пациента.
Антитела Ig A – это антитела, которые в основном повышаются при воспалительных процессах на слизистых оболочках. Они могут быть повышены как при острой, так и при хронической инфекции. Высокий уровень IgA к микробу или вирусу обычно отражает активное течение инфекции.
РПГА (реакция пассивной гемагглютинации) – метод исследования близкий к определению антител, основанный на определении агглютинации (склеивание и выпадение в осадок) эритроцитов. РПГА часто используется для определения сальмонеллы, иерсинии, шигелл, бледных трепонем (сифилиса).
Использование других антител применяется при различных специфических инфекциях, например, при бруцеллезе, сифилисе, бореллиозе и других серьёзных инфекциях.
Иммуноблот и иммуночип – это определение большого количества антител к различным антигенам одного микроорганизма. Целесообразно исследовать иммуноблот или иммуночип в сомнительных случаях, когда инфекция протекает скрыто и, и её диагностика затруднена с помощью обычного исследования IgG, IgM, IgA. Например, иммуноблот и иммуночип, актуальны при диагностике бореллиоза, который может протекать скрыто и плохо диагностироваться, сифилиса и хеликобактерной инфекции.
Для чего нужно определять антитела к инфекциям? Определив количество и набор этих антител можно судить, контактировала ли иммунная система с данной инфекцией, есть ли сейчас контакт с данной инфекцией и есть у иммунной системы антитела к инфекции или нет. Полученные данные анализов используются для интерпретирования текущего состояния пациента и для постановки клинического диагноза, также эти данные используются для оценки проводимого лечения.
Анализ на стрептококковую инфекцию. Антистрептолизин-О (АСЛО)
то такое антистрептолизин О (АСЛО)? Антистрептолизин О (АСЛО) – это маркер стрептококковой инфекции в организме. При попадании в организм человека, стрептококк группы А начинает вырабатывать антиген (чужеродный для организма человека белок) – стрептолизин, а иммунная система, для защиты организма, начинает вырабатывать антитела к этому антигену – антистрептолизин О (АСЛО). Повышенный антистрептолизин О (АСЛО) говорит о перенесенной стрептококковой инфекции, о ревматическом заболевании, спровоцированном стрептококком, или риске ревматического заболевания. Обычно, по уровню АСЛО в крови можно определить, когда человек болел стрептококковой инфекцией: уровень антистрептолизина О увеличивается спустя 1 неделю после инфекции и достигает своего пикового значения через 4-5 недель. При хронической стрептококковой инфекции (чаще это хронический тонзиллит при неудовлетворительных результатах лечения) высокий уровень АСЛО может держаться месяцы и годы.
Что делать при обнаружении высокого антистрептолизина О:
- Обратиться к ЛОР-врачу (оториноларингологу), т.к. в большинстве случаев источник стрептококковой инфекции – миндалины или аденоиды. Правильное лечение хронического тонзиллита и аденоидита в большинстве случаев решает проблему повышенного АСЛО и ревматического риска.
- Получить консультацию врача ревматолога, возможно проверить органы-мишени ревматизма (сердце, почки, суставы, нервную систему).
Для чего нужен анализ на антистрептолизин О (АСЛО)? Анализ антистрептолизина О применяется для диагностики ревматологических заболеваний и их риска при стрептококковой инфекции. При лечении хронического тонзиллита от уровня АСЛО зависит тактика лечения. Уровень АСЛО в крови особенно важен для дифференциальной диагностики ревматизма и ревматоидного артрита (при истинном ревматизме антистрептолизин О повышается гораздо чаще и выше).
Где сдать анализ на антистрептолизин О (АСЛО)? В нашей клинике Вы можете сдать кровь на антистрептолизин О семь дней в неделю. Мы рекомендуем сдавать кровь утром натощак, а накануне, по возможности, избегать переедания.
Основные показания к анализу на антистрептолизин О (АСЛО):
- Обследование на ревматизм, ревматоидный артрит и другие ревматические заболевания, ревматическое поражение сердца – миокардит и почек – гломерулонефрит
- Хронический тонзиллит
- Любая стрептококковая инфекция (рожа, отит, скарлатина и т.д.)
Анализ ликвора на нейроинфекции. Исследование цереброспинальной жидкости на вирусы, бактерии, грибы
Наша клиника специализируется в неврологии, нейроиммунологии и лечении аутоиммунных заболеваний нервной системы. Исследование ликвора на нейроинфекции – один из самых достоверных методов лабораторной диагностики воспалительных и аутоиммунных заболеваний нервной системы. Мы предложим Вам исследование ликвора на нейроинфекции в амбулаторном режиме, с пребыванием в палате дневного наблюдения. Подробнее о процедуре получения ликвора.
Ряд исследований на нейроинфекции можно выполнить и с помощью исследования крови: подробнее.
Какие именно нейроинфекции доступны для исследования в нашей клинике:
Хламидия трахоматис / Chlamydia trachomatis ПЦР |
Вирус простого герпеса 1 и 2 типов / Herpes simplex virus I, II ПЦР |
Возбудитель сифилиса / Treponema pallidum ПЦР |
Цитомегаловирус / Cytomegalovirus ПЦР |
Вирус Эпштейн-Барр / Epstein Barr virus ПЦР |
Вирус герпеса 6 типа / Human herpes virus VI ПЦР |
Возбудитель туберкулеза / Mycobacterium tuberculosis complex ПЦР |
Листерия / Listeria monocitogenes ПЦР |
Токсоплазма / Toxoplasma gondii ПЦР |
Микроскопическое исследование окрашенного мазка (бактериоскопия) |
Посев на микрофлору и определение чувствительности к антибиотикам |
Посев ликвора на менингококк |
Посев на грибы рода кандида и определение чувствительности к антимикотическим препаратам |
Посев на анаэробную микрофлору и определение чувствительности к антибиотикам |
Посев на гонококк и определение чувствительности к антибиотикам |
Серологическая диагностика клещевого боррелиоза методом иммуночипа (кровь + СМЖ) |
Энтеровирус / PHK Enterovirus ПЦР |
Вирус Варицелла-Зостер (возбудитель опоясывающего лишая) / Varicella-Zoster ПЦР |
Аденовирус / Adenovirus (группы В, С, Е) ПЦР |
Исследование ликвора помогает провести дифференциальную диагностику между нейроинфекцией и демиелинизирующим заболеванием, нейросаркоидозом, нейролейкозом и т.д. Исследование ликвора помогает диагностировать нейроборрелиоз в сомнительных случаях. Также возможно исследование ликвора на наличие олигоклональных антител Igg для диагностики рассеянного склероза.
Проведение люмбальной пункции. Люмбальная пункция – это метод получения ликвора для лабораторного исследования. Более подробную информацию о люмбальной пункции Вы можете узнать здесь.
Для выполнения люмбальной пункции нам могут понадобиться:
- МР-томография головного мозга. Если у Вас есть снимки головного мозга давностью не более 3х месяцев, пожалуйста, принесите их в клинику. Это важно для Вашей безопасности: возможны риски.
- Осмотр врачом неврологом. Врач, который будет делать люмбальную пункцию, должен точно знать показания к этому исследованию в Вашем случае и понимать возможные риски.
Анализ спермы на вирусы, бактерии, грибы. Исследование секрета простаты и эякулята на вирусы, бактерии, грибы
Наша клиника занимается диагностикой, лечением и профилактикой болезней мочеполовой системы. Анализ спермы и/или секрета простаты на инфекции – достоверный метод лабораторной диагностики воспалительных заболеваний мочеполовой системы. При простатите, везикулите, болезнях яичек, мужском бесплодии исследование спермы на инфекции более достоверно, чем обычный мазок или анализ мочи. Мы предложим Вам сдать анализ спермы на вирусы, бактерии и грибы 7 дней в неделю. Подробнее о процедуре сдачи спермы (эякулята) для анализов.
Возможно исследование спермы методом ПЦР и бактериологического посева.
Какие именно инфекции доступны для исследования в нашей клинике:
ПЦР:
Кандида альбиканс / Candida albicans ПЦР |
Хламидия трахоматис / Chlamydia trachomatis ПЦР |
Цитомегаловирус / Cytomegalovirus ПЦР |
Вирус Эпштейн-Барр / Epstein Barr virus ПЦР |
Гарднерелла вагиналис / Gardnerella vaginalis ПЦР |
Вирус простого герпеса 1 и 2 типов / Herpes simplex virus I, II ПЦР |
Вирус герпеса 6 типа / Human herpes virus VI ПЦР |
Микоплазма гениталиум / Mycoplasma genitalium ПЦР |
Микоплазма хоминис / Mycoplasma hominis ДНК |
Нейссерия гонореи / Neisseria gonorrhoeae ПЦР |
Трихомонада вагиналис / Trichomonas vaginalis ПЦР |
Уреоплазма парвум / Ureaplasma parvum ПЦР |
Уреоплазма уреалитикум / Ureaplasma urealyticum ПЦР |
Бактериологический посев спермы: любая бактериальная флора, поддающаяся культивации на стандартной питательной среде.
Расшифровкой результатов анализа спермы на инфекции, обычно, занимается врач уролог-андролог, дерматовенеролог или иммунолог. При необходимости, мы предложим Вам консультацию врача соответствующей специальности.
Исследование спермы на инфекции помогает выяснить причину хронических, рецидивирующих болезней мочеполовой системы. В некоторых случаях, после подтверждения вирусной природы хронического простатита и назначения адекватного лечения, можно добиться значительного прогресса в лечении болезни без хирургического вмешательства.
При обращении в нашу клинику с проблемой мужского бесплодия, мы рекомендуем сдавать анализ спермы на вирусы, бактерии и грибы. Наш опыт лечения мужского бесплодия показывает, что часто к бесплодию приводят инфекции мужских половых органов, включая цитомегаловирус и вирус герпеса 6 типа.
Где сдать анализ спермы на инфекции. Мы предложим Вам сдать анализ спермы на вирусы, бактерии и грибы 7 дней в неделю в нашей клинике.
Как сдавать сперму на инфекции. Перед сдачей спермы (эякулята) на исследование, рекомендуется половое воздержание в течение 3-5 дней. Собрать эякулят (сперму) для исследования на вирусы, бактерии и грибы Вы можете в комфортных условиях дома, в стерильный контейнер, который мы Вам выдадим. Важно доставить полученный образец эякулята в клинику в течение 4х часов.
Основные показания к сдаче спермы (эякулята) на вирусы, бактерии и грибы:
- Простатит
- Эпидидимит
- Орхит
- Бесплодный брак
- Выявление мужского бесплодия с нарушением сперматогенеза
- Хламидиоз, микоплазмоз, инфекция вирусами герпес-группы
- Хронический цистит
- Хронический уретрит
- Хроническая тазовая боль
- Подготовка к ЭКО (экстракорпоральному оплодотворению)
Будем рады Вам помочь!
Источник