Кровь на антиген вируса простого герпеса 2 типа

Кровь на антиген вируса простого герпеса 2 типа thumbnail

Метод определения
ПЦР с детекцией в режиме реального времени».

Исследуемый материал
Кровь (ЭДТА)

Раздельное определение ДНК-вируса простого герпеса 1 типа (губного или лабиального) и 2 типа (генитального) в крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме реального времени. 

Термин «герпес» (от древнегреч. – ползти, ползучий) возник ещё в древнем Риме. Но именно сейчас скорость распространения этого заболевания опережает темпы прироста населения Земли. Частота инфицирования вирусом простого герпеса второго типа в Европе достигает 44%. Герпес занимает второе место по распространенности среди заболеваний, передающихся половым путем, после трихомониаза и второе место после гриппа по смертности от вирусных инфекций. 

Вирусы простого герпеса первого (ВПГ-1) и второго (ВПГ-2) типа относят к семейству герпес-вирусов (Herpesviridae), общим свойством которых является постоянное персистирование в организме после инфицирования. Эти вирусы попадают в организм через слизистые (обычно «входные ворота» для ВПГ-1 – слизистые ротовой полости и носоглотки, для ВПГ-2 – слизистые половых органов). Клинические проявления герпетической инфекции в любой форме (высыпания на коже и слизистых оболочках, симптомы поражения нервных клеток и др.), как правило, свидетельствуют о снижении иммунитета. Первичная герпетическая инфекция и реактивация инфекции (в гораздо меньшей степени) в период беременности могут вызывать патологию беременности, внутриутробное инфицирование плода или инфицирование ребенка во время родов. 

Возможность определения типа вируса простого герпеса − достижение лабораторной диагностики последних лет. Это позволяет уточнить особенности патогенеза заболевания, разработать методы профилактики, программы терапии и предупреждения рецидивов. Хотя оба типа ВПГ могут вызывать аналогичные клинические проявления, всё большее значение приобретает их дифференциальная диагностика. Так ВПГ-1 в настоящее время представляется как один из факторов риска возникновения болезни Альцгеймера. Аногенитальная герпетическая инфекция, обусловленная ВПГ-2, по сравнению с ВПГ-1 характеризуется большей частотой развития рецидивов. Вирус простого герпеса второго типа, по-видимому, связан с раком шейки матки и раком влагалища и повышает восприимчивость к ВИЧ-инфекции. Для терапии вируса простого герпеса второго типа разработан и применяется специфический иммуноглобулин (IMMUNOGLOBULINUM CONTRA HERPES VIRUS SIMPLEX TYPUS 2 HUMANUM).

Аналитические показатели:

  • определяемый фрагмент − специфичные участки ДНК герпес-вирусов 1 и 2 типа; 
  • специфичность определения −100%; 
  • чувствительность определения − 100 копий ДНК герпес-вирусов 1 и 2 типа в образце.

Литература

  • Халдин А.А., Баскакова Д.В. Эпидемиологические аспекты заболеваний, вызываемых вирусом простого герпеса (обзор литературы). Consilium Medicum. Дерматология, 2007 
  • https://www.consilium-medicum.com/article/15019  
  • Инфекционные болезни у детей. Ред. Д. Марри. М: Практика, 2006 г., 928 c. 
  • Шульженко А.Е., Викулов Г.Х., Тутушкина Т.В. Герпетические инфекции — настоящее и будущее// Трудный пациент. 2003. № 4. Т. 1. С. 6–15.

Источник

После заражения герпетической инфекцией вирус встраивается в структуру ДНК нервной системы. В отсутствии заболеваний и иных факторов, ослабляющих иммунитет, возбудитель не несёт опасности для организма. Однако перед беременностью, а также лицам с иммунодефицитом, необходимо провести анализ на ВПГ (вирус простого герпеса). В первом случае возбудитель способен нарушить внутриутробное развитие ребёнка, во втором — вызвать тяжёлые болезни внутренних органов.

Показания к сдаче анализа

Анализ на вирус простого герпеса 1 и 2 типа (HSV 1 и 2) проводится несколькими способами. К подобным исследованиям прибегают в следующих случаях:

  • заболевание протекает без выраженных признаков (особенно важно проводить диагностику инфекций, когда идёт развитие генитального герпеса);
  • у женщин, планирующих беременность, ранее не проявлялись признаки герпеса на слизистой оболочке половых органов или на других участках тела;
  • частые рецидивы герпеса;
  • частые обострения хронических заболеваний;
  • бесплодие и иные болезни органов репродуктивной системы неустановленной этиологии.

Анализ на HSV 1 и 2 также рекомендован лицам, у которых повышен риск развития герпеса: пациенты, перенёсшие операцию по пересадке органов, химиотерапию. Не менее важно пройти процедуру больным ВИЧ и аутоиммунными патологиями.

Сдать анализ на антитела к ВПГ 1 и 2 потребуется в обязательном порядке как до, так и после зачатия. Объясняется это тем, что в отсутствии вируса в организме контакт с носителем возбудителя болезни приводит к заражению не только матери, но и будущего ребёнка. Первичная инфекция во время беременности провоцирует нарушения в развитии или гибель плода. Кроме того, чтобы избежать заражения новорождённого во время родов, рекомендуется провести анализ крови на ВПГ 2. В случае если результаты исследования покажут наличие герпеса этого типа, нередко назначают кесарево сечение.

Обнаружить ВПГ можно с помощью следующих методов:

  1. Полимеразная цепная реакция (ПЦР). Этот анализ крови на вирус герпеса 1 и 2 типа способен выявить наличие ДНК вируса в организме человека.
  2. Иммуноферментный анализ (ИФА). Метод основан на выявлении иммуноглобулинов, которые организм вырабатывает после заражения ВПГ. ИФА помогает диагностировать вирус, даже если инфицирование было давно.

В случае если проведённый анализ на герпес 1 и 2 типа не дал точного результата, применяется реакция иммунофлюоресценции (РИФ). Данный метод также предусматривает исследование крови, взятой у пациента.

Читайте также:  Герпес болят губы внутри

Если герпес часто проявляется на губах, необходимо оценить состояние иммунной защиты, для чего назначается иммунограмма. В тяжёлых ситуациях применяется биохимический анализ крови, с помощью которого выявляются нарушения в работе внутренних органов. Этот метод особенно актуален в случаях обострения генитальной инфекции.

Полимеразная цепная реакция

ПЦР-диагностика проводится с помощью жидкости, взятой из пузырьковой сыпи, или соскобов со слизистых оболочек. Это исследование наиболее результативно непосредственно после инфицирования. Определение ДНК методом ПЦР проводится с целью диагностирования типа вируса.

Эффективность полимеразной цепной реакции объясняется тем, что организм после заражения вырабатывает антигены к ВПГ, которые выявляются в исследуемом материале.

ПЦР анализ – что это такое

Подготовка к процедуре

Диагностику инфекций проводят в лаборатории. Прежде чем сдать материал на ПЦР, пациенту необходимо:

  • в течение 3-4 дней избегать половых контактов;
  • за неделю отказаться от спринцевания и использования вагинальных свечей;
  • отказаться от посещения бань, саун, бассейнов;
  • не потреблять алкогольные напитки, жареные и солёные продукты;
  • по возможности ограничить приём медикаментов.

Полимеразная цепная реакция не проводится в период острого течения инфекционных заболеваний, после сильного переутомления или стресса. Каждый из приведённых факторов может повлиять на результаты исследования.

Результаты

Анализ на выявление антигенов вируса простого герпеса позволяет оценить концентрацию частицы возбудителя во взятом материале. В случае если исследование дало положительный результат, говорят о наличии инфекции в организме. В подобных ситуациях назначается лечение противовирусными препаратами либо корректируется проводимая терапия.

Когда исследование даёт результат с отрицательным значением, то процедуру необходимо повторить. Если и следующий анализ не выявил наличие антигенной нагрузки, то противовирусное лечение не проводится.

ПЦР — ни одна инфекция не останется не обнаруженной

Биопсия как дополнение ПЦР

Важная особенность ПЦР заключается в том, что результаты анализов на герпес 1 и 2 типов будут положительны при условии наличия вируса в собранном материале. Однако со временем концентрация возбудителя в отделяемых жидкостях снижается. При этом сохраняется воспаление тканей органов репродуктивной системы.

Этот процесс развивается из-за того, что вирус герпеса меняет иммунный ответ, и организм начинает атаковать собственные клетки. В итоге полимеразная цепная реакция не даёт положительный результат при хроническом течении заболевания. В подобных обстоятельствах менее информативным становится анализ на антитела класса М и G к вирусу простого герпеса (ИФА).

В таких условиях назначается провокационный тест, в рамках которого пациенту назначается приём «Пирогенала» или других препаратов, после чего исследуется кровь на предмет обнаружения частиц возбудителя.

Дополнительно проводится биопсия тканей органов, которые, как предполагает врач, поражены герпесом. Материал забирается из полости матки, предстательной железы или других отделов репродуктивной системы.

Цитопатические изменения клеток герпес определяются посредством обработки взятых образцов формалином и парафином. Вирус, встраиваясь в организм, повреждает ткани изнутри. Поэтому, если в ходе исследования выявляются изменённые ядра и цитоплазма клеток, диагностируется наличие герперовируса. Кроме того, соответствие норме лейкоцитов в мазке также указывает на инфицирование данным возбудителем.

Иммуноферментный анализ

После заражения герперовирусом организм человека вырабатывает особые белки (антитела), которые подавляют активность инфекции. Эти иммуноглобулины разносятся по телу и начинают бороться с возбудителем в зонах, в которые тот «спускается».

Выделяют несколько классов антител, которые выявляются с помощью иммуноферментного анализа:

  1. IgM. Антитела этого типа формируются в течение первых двух недель после заражения. В случае если ИФА покажет наличие IgM в крови, то говорят о недавнем инфицировании либо об обострении герпеса. Со временем концентрация этих антител постепенно снижается.
  2. IgG. Антитела появляются спустя некоторое время после заражения (примерно на 12-16 день). Как и в случае с IgM концентрация IgG повышается при рецидивах заболевания.
  3. IgG к предранним белкам герперовируса. Эти антитела также возникают во время обострения болезни.

В рамках иммуноферментного анализа оценивается авидность иммуноглобулинов IgG. Данный показатель определяет способность антител связываться с вирусными частицами. При обострении болезни авидность низкая. По мере прогрессирования герпеса показатель постепенно повышается. Авидность помогает уточнить, когда произошел рецидив.

Расшифровка

В расшифровке анализа крови на герпес 1 и 2 типа указывают обычно herpes simplex титр. Исследование даёт следующие результаты:

  1. Отсутствие антител IgG и IgM. Пациент не является носителем герпеса.
  2. Отсутствие IgM и наличие ранних и поздних IgG. Результат свидетельствует о недавнем заражении (подтверждается с помощью ПЦР) или рецидиве болезни.
  3. Наличие только поздних IgG. Результат анализа показывает наличие вируса в организме в латентном состоянии.
  4. Наличие IgM и IgG (в том числе и поздних). Результат анализа сообщает о недавнем обострении или заражении.
  5. Результаты анализа на авидность расшифровываются следующим образом:
  6. 50-60%. Такой результат требует повторного проведения иммуноферментного анализа через 2 недели.
  7. Ниже 50%. Показатель свидетельствует о недавнем заражении.
  8. Выше 60%. Выявлен хронический герпес.

В случае если результат исследования окажется положительным, то пациенту необходимо обратиться к терапевту (дерматологу) при герпесе, локализующемся на теле, или гинекологу (урологу) — на половых органах.

Реакция иммунофлюоресценции

Эффективность РИФ напрямую зависит от уровня концентрации вируса в собранном материале. Суть метода сводится к следующему: в кровь вводятся специальные красящие вещества, в состав которых включают антитела к герпесу. В случае если в организме присутствует возбудитель, последний вступает в химическую реакцию. Красящие вещества подсвечивают вирусные частицы под микроскопом.

Читайте также:  Опасен герпес у маленьких детей на губах

РИФ для выявления герпеса применяется редко. Объясняется это высокой чувствительностью метода к различным инфекциям. Поэтому, если в организме человека присутствуют другие вирусные частицы, результат РИФ окажется ложноположительным.

Другие методики

Иногда для выявления герпеса в организме применяется культуральный метод, в рамках которого производится забор клеток. Последние затем заражаются вирусными частицами, после чего оценивается характер протекающих процессов.

При необходимости назначаются аллергопробы, которые исключают или подтверждают наличие у пациента повышенной чувствительности к определённым раздражителям. Данная процедура проводится в случаях, когда не удаётся дифференцировать по внешним признакам аллергическую реакцию и обострение герпеса из-за схожести в симптомах.

Список анализов, необходимых для постановки диагноза, составляется индивидуально для каждого пациента. Герперовирусы 1 и 2 типов не создают угрозы для организма. При этом частые проявления инфекции свидетельствуют о резком ослаблении иммунитета. В подобных случаях нужно обращаться к иммунологу.

Источник

Авидность антител IgG к вирусу простого герпеса I и II типов – общая стабильность связывания антител с антигенами вируса, которая характеризуется низкоавидными антителами IgG в первые недели и месяцы после первичного инфицирования, их постепенным исчезновением из крови и заменой на высокоавидные антитела IgG, что позволяет благодаря определению индекса авидности отличить первичную инфекцию от рецидива.

Данный анализ используется для подтверждения или исключения недавнего первичного инфицирования вирусом простого герпеса I или II типа, дифференциальной диагностики первичного инфицирования герпес-вирусной инфекцией и реактивации хронической или латентной инфекции, оценки риска передачи герпетической инфекции плоду или новорождённому и развития связанным с вирусом осложнений.

Назначается при выявлении положительных и сомнительных результатов определения IgG- и IgM-антител к вирусу простого герпеса, при обследовании беременных с подозрением на первичное инфицирование герпес-вирусом.

Какие тесты входят в данный комплекс:

  • Herpes Simplex Virus 1/2, IgG
  • Определение авидности IgG к Herpes simplex virus 1/2

Синонимы русские

Авидность, антитела класса G, ВПГ-1, ВПГ-2, герпес-вирус человека, тип 2, герпес-вирус человека, тип 1.

Синонимы английские

Нerpes simplex virus type 1 (HSV-1); Нerpes simplex virus type 2 (HSV-2), HSV avidity antibodies (IgG).

Метод исследования

  • Хемилюминесцентный иммуноферментный анализ — Herpes Simplex Virus 1/2, IgG;
  • иммуноферментный анализ — определение авидности IgG к Herpes simplex virus 1/2.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Герпетическая инфекция (ГИ) может формировать тяжелую патологию у детей и взрослых, особенно у иммунодефицитных лиц. Наибольшую опасность это заболевание представляет для беременных женщин, у которых в результате первичной инфекции может произойти самопроизвольный выкидыш либо родиться ребенок с тяжелыми пороками развития. Важной задачей для врача является определение сроков инфицирования беременной. Кроме того, определение формы герпетической инфекции (первичная, рецидивирующая) важно с точки зрения выбора тактики лечения. Серологические тесты, в которых у обследуемых лиц определяют наличие антител к вирусу простого герпеса (ВПГ), позволяют выявлять в крови первично инфицированного ВПГ человека специфические иммуноглобулины класса М (ВПГ-IgM) через 4-6 дней, иммуноглобулины класса G (ВПГ-IgG) через 10-14 дней с момента клинических проявлений заболевания. Продукция IgM достигает максимального значения на 15-20-е сутки. IgM сохраняются в организме человека недолго (1-2 месяца), а IgG – всю жизнь на высоком уровне. Это обусловлено тем, что ВПГ относится к возбудителям, которые могут персистировать в организме человека неограниченно долго (пожизненно) в латентной форме. Рецидивирующий герпес обычно протекает на фоне высокой концентрации IgG, что свидетельствует о постоянной антигенной стимуляции организма больного. Однако следует иметь в виду, что далеко не всегда высокие титры коррелируют с активностью инфекционного процесса. Появление IgM у таких больных говорит об обострении болезни. IgM к ВПГ могут образовываться как при первичном инфицировании, так и при реинфекции и при реактивации вируса. Таким образом, выявление специфических IgM не является надежным и достоверным доказательством первичной герпетической инфекции. Кроме того, отсутствие IgM и/или динамики титров специфических IgG могут быть обусловлены поздним сроком взятия крови с момента инфицирования или неадекватным иммунным ответом, связанным с нарушениями иммунной системы.

Данное исследование позволяет определить антитела IgG к 1-му и 2-му типу вируса простого герпеса в сыворотке крови. Антитела IgG к вирусу простого герпеса 1-го или 2-го типа обнаруживают у 80-90 % взрослых людей, поэтому однократное их определение не имеет клинического значения. Важно наблюдать за динамикой изменения их уровня. При острой инфекции или реактивации вируса выявляется нарастание уровня антител IgG. Антитела IgG могут циркулировать пожизненно. 4-кратное нарастание уровня антител при исследовании в парных сыворотках, взятых с интервалом 7-10 суток, свидетельствует о рецидивирующей герпетической инфекции. Определение IgG в сыворотке крови к вирусу простого герпеса 2-го типа показано всем беременным, так как установлено, что инфицированные имеют в 2-3 раза больший риск спонтанного аборта и инфицирования новорождённого по сравнению с интактными пациентами.

Читайте также:  От чего происходит герпес в матке

При инфицировании вирусом простого герпеса 1-го и/или 2-го типа концентрации антител IgG на ранних стадиях инфекции могут не обнаруживаться. Уровни антител могут быть очень низкими или необнаруживаемыми в периоды между реактивациями. В подобных ситуациях можно получить отрицательный результат даже при наличии предшествующего контакта с вирусом.

Определение авидности IgG – характеристика прочности связи специфических антител с соответствующими антигенами (определяется числом связывающих участков и силой связывания). Высокая авидность специфических IgG-антител позволяет исключить недавнее первичное инфицирование. Определение индекса авидности IgG к вирусу простого герпеса 1-го и 2-го типа позволяет уточнить сроки инфицирования и дифференцировать первичную герпетическую инфекцию от обострения хронической или латентно текущей инфекции.

Вирус простого герпеса 1-го типа. Наиболее частые клинические проявления:

  • орально-фациальные поражения;
  • афтозно-язвенный стоматит;
  • лабиальный герпес;
  • герпетический дерматит;
  • герпетиформная экзема;
  • кератит;
  • конъюнктивит;
  • энцефалит.

Вирус простого герпеса 2-го типа. Наиболее частые клинические проявления:

  • генитальные поражения слизистых;
  • менингит.
  • Для подтверждения или исключения недавнего первичного инфицирования вирусом простого герпеса 1-го или 2-го типа;
  • для дифференциальной диагностики первичного инфицирования герпес-вирусной инфекцией и реактивации хронической или латентной инфекции;
  • для оценки риска передачи герпетической инфекции плоду или новорождённому и развития связанным с вирусом осложнений.
  • При выявлении положительных и сомнительных результатов определения IgG- и IgM-антител к вирусу простого герпеса;
  • при обследовании беременных с подозрением на первичное инфицирование герпес-вирусом.

Herpes Simplex Virus 1/2, IgG

Референсные значения: отрицательно.

Положительный результат означает присутствие антител IgG к HSV-1 или HSV-2, что указывает либо на активную, либо на перенесенную в прошлом герпес-вирусную инфекцию.

Отрицательный результат говорит о малой вероятности острой герпес-вирусной инфекции, а также о том, что организм до этого не контактировал с вирусом простого герпеса. Однако непосредственно после инфицирования, когда достаточное количество антител еще не выработалось, результат может оказаться ложноотрицательным. В этом случае рекомендуется дополнительный тест на IgM и повторный анализ на IgG через несколько недель.

Определение авидности IgG к Herpes simplex virus 1/2

Единицы измерения: результаты приводятся в виде индекса авидности (ИА), %.

Индекс авидности менее 50 % – низкоавидные антитела IgG к ВПГ. При первичной инфекции более 50 % антител, персистирующих в организме, обладают низкой авидностью. Если в крови при наличии IgM обнаруживаются IgG с низкой авидностью, то это свидетельствует об острой стадии первичной инфекции. Обнаружение низкоавидных IgG без присутствия IgM может иметь место при сроках инфицирования более 1 месяца. В таких случаях необходимо определять в динамике увеличение титра IgG и изменение индекса авидности.

Индекс авидности 50-60 % – пограничная авидность (серая зона). Пограничный результат указывает на позднюю первичную либо раннюю паст-инфекцию.

Индекс авидности более 60 % – высокоавидные антитела IgG к ВПГ. Наличие высокоавидных IgG при наличии IgM предполагает реактивацию герпетической инфекции либо свидетельствует о вторичном иммунном ответе в случае реинфекции ВПГ. Определение высокоавидных IgG при отсутствии IgM свидетельствует о паст-инфекции. При паст-инфекции (рецидивирующий герпес, первый эпизод непервичного герпеса) индекс авидности IgG составляет 60-100 %.

Только с наработкой высокоавидных ВПГ-IgG и стабилизацией их концентрации можно говорить об окончании острой фазы первичной герпетической инфекции.



Кто назначает исследование?

[07-031] Herpes Simplex Virus 1/2, IgM

[09-013] Herpes Simplex Virus 1/2, ДНК [реал-тайм ПЦР]

[09-013] Human Papillomavirus высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типы), ДНК генотипирование [реал-тайм ПЦР]

Литература

1. Набор реагентов для иммуноферментного определения индекса авидности иммуноглобулинов класса G к вирусу простого герпеса 1 и 2 типов в сыворотке (плазме) крови. – ВектоВПГ-1,2-IgG-авидность. – Инструкция по применению. – 2014.

2. Герпетическая инфекция. А.В. Мурзич, М.А. Голубев. Государственный научно-исследовательский центр профилактической медицины МЗ РФ. Южно-Российский медицинский журнал. – № 3. – 1998.

3. Levi M., Ruden U., Wahren B. Peptide sequences of glycoprotein G-2 discriminate between Herpes simplex virus type 2 (HSV-2) and HSV-1 antibodies. // Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology. -1996. — Vol. 3, No.3. — P. 285-289.

5. Liljeqvist J., Trubala E. Localization of type -specific epitopes of Herpes simplex virus type 2 glycoprotein G recognized by human and mouse antibodies. // Journal of General Virology. -1998. — Vol. 79. — P. 1215-1224.

Источник