Сдать пцр на герпес 6 типа
Исследование для выявления возбудителя герпес-вирусной инфекции 6-го типа (Human Herpes Virus 6), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется генетический материал (ДНК) вируса в образце биоматериала.
Синонимы русские
Герпес-вирус 6-го типа, ВГЧ-6, РТ-ПЦР.
Синонимы английские
HHV-6, DNA [Real-time PCR].
Метод исследования
Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Биоптат, венозную кровь, ликвор, мазок из зева (ротоглотки), слюну.
Общая информация об исследовании
6-й тип герпес-вируса человека (ВГЧ-6) впервые был определен относительно недавно, в 1986 г., в крови ВИЧ-инфицированных пациентов. К настоящему времени установлено, что инфекция ВГЧ-6 широко распространена и имеет 2 подтипа, отличающихся генетически, – А и В. В целом более распространен подтип В, однако подтип А чаще обнаруживают у пациентов с иммунодефицитами.
Полная репликация вируса происходит только в Т-лимфоцитах, но ВГЧ-6 может быть выявлен и в других клетках – моноцитах, В-лимфоцитах, а также в ткани мозга, печени, слюнных желез, в эндотелии.
Наиболее вероятный путь заражения – воздушно-капельный, со слюной, не исключена передача инфекции от матери к ребенку во время беременности.
Также существует возможность инфицирования при трансплантации органов, гемотрансфузиях, через медицинские инструменты. Наркоманы и медицинские работники могут заразиться при случайном уколе иглой шприца, содержащего кровь больного либо инфицированного.
Первый раз заражение практически всегда происходит в возрасте от 4 до 24 месяцев. В большинстве случаев ВГЧ-6 протекает бессимптомно, а если проявляется, то чаще всего как внезапная экзантема и быстро развивающаяся сильная лихорадка, продолжающаяся 3-4 дня. Через несколько часов после нормализации температуры появляются эритематозные пятна или пятнисто-папулезная сыпь. Сходство внезапной экзантемы с симптомами кори или краснухи зачастую приводит к постановке ошибочного диагноза.
В некоторых случаях бывают осложнения со стороны центральной нервной системы (судороги на фоне высокой температуры, редко энцефалит, менингоэнцефалит, серозный менингит).
Взрослые редко инфицируются ВГЧ-6, причем заражение у них может сопровождаться симптомами инфекционного мононуклеоза (вирус Эпштейна – Барр в таком случае отсутствует) или фульминантного гепатита.
ВГЧ-6 способен вызвать отторжение трансплантата у реципиентов. Осложнения вследствие активации ВГЧ-6 отмечены у пациентов после пересадки костного мозга, почек, печени, легких. В частности, пациенты после трансплантации костного мозга часто страдают от заболеваний, обусловленных HHV-6 (интерстициальная пневмония, супрессия костного мозга, менингоэнцефалит). Активация ВГЧ-6 является причиной 80 % случаев идиопатической лейкопении после трансплантации печени. К счастью, при своевременной диагностике ВГЧ-6 поддается лечению с помощью лекарственных препаратов.
ВИЧ-инфицированные составляют еще одну категорию лиц с иммунодефицитом, у которых активация ВГЧ-6 способна приводить к серьезным осложнениям (к поражениям ЦНС, к пневмонии и пр.) и прогрессированию основного заболевания. Кроме того, активный ВГЧ-6 может способствовать переходу ВИЧ из латентной в активную форму, поэтому регулярный контроль активности ВГЧ-6 у ВИЧ-положительных пациентов важен для своевременного начала антивирусной терапии.
Сегодня активно исследуется возможная роль ВГЧ-6 в развитии рассеянного склероза, синдрома хронической усталости, лимфопролиферативных заболеваний.
Так как ВГЧ-6 в латентной форме распространен практически повсеместно, очень важно вовремя устанавливать характер его течения – активный/неактивный. Активация любой вирусной инфекции начинается с размножения (репликации) вируса в клетке-хозяине. Далее в большинстве случаев клетки-хозяева погибают, а новые вирусы выходят в межклеточное пространство (внутритканевую жидкость) для заражения новых клеток. Оттуда вирусные частицы попадают в различные биологические жидкости (кровь, мочу, ликвор) и железистые секреты, где могут быть легко обнаружены с помощью ПЦР. Выявление вирусных ДНК/РНК в бесклеточных образцах биологических жидкостей или железистых секретах является однозначным указанием на активную вирусную инфекцию. Однако диагностика инфекции осложняется тем, что ВГЧ-6 после репликации в клетке-хозяине заражает другие клетки напрямую, проникая через межклеточные перегородки и избегая межклеточных пространств. Таким образом, подтверждение активности ВГЧ-6 посредством ПЦР в бесклеточных образцах биологических жидкостей и секретах удается не во всех случаях. В связи с этим возникает необходимость подтверждения активности/неактивности ВГЧ-6 с помощью серологических методов.
Когда назначается исследование?
- При дифференциальной диагностике детских инфекций, протекающих с высокой температурой и сыпью.
- При диагностике инфекционного мононуклеоза при отрицательном тесте на вирус Эпштейна – Барр.
- В комплексе обследований пациентов с лимфопролиферативными заболеваниями и гемобластозами.
- При обследовании реципиентов органов и тканей до и после трансплантации.
- При диагностике вирус-ассоциированных заболеваний у ВИЧ-инфицированных и при других иммунодефицитных состояниях (например, синдроме хронической усталости).
- При контроле за эффективностью проведенного антивирусного лечения.
Для чего используется исследование?
- Для подтверждения наличия/отсутствия инфекции.
- Для того чтобы определить характер течения инфекции – активный/неактивный.
- Для дифференциальной диагностики герпетических инфекций.
Что означают результаты?
Референсные значения
Результат: отрицательный.
Причины положительного результата
- Однократный положительный результат реал-тайм ПЦР однозначно свидетельствует об активной ВГЧ-6 инфекции.
Причины отрицательного результата
- Однократный отрицательный результат реал-тайм ПЦР может быть признаком отсутствия активной ВГЧ-6-инфекции и нуждается в дополнительном подтверждении с помощью ретроспективных исследований вирусоспецифических IgG-антител.
Что может влиять на результат?
Свойство ВГЧ-6 поражать другие клетки напрямую, не выходя за их пределы, способствует ложноотрицательному результату.
Важные замечания
- Лимфоциты и моноциты крови являются местом постоянного обитания и размножения ВГЧ-6 у инфицированных людей, поэтому надежным свидетельством активации/реактивации ВГЧ-6 служит обнаружение ДНК ВГЧ-6 в бесклеточных производных крови – сыворотке или бесклеточной плазме.
Также рекомендуется
- Human Herpes Virus 6, IgG
Кто назначает исследование?
Аллерголог-иммунолог, акушер, гинеколог, инфекционист, педиатр, невролог, гематолог, хирург.
Литература
- Nolan T, Hands RE, Bustin SA (2006). «Quantification of mRNA using real-time RT-PCR.». Nat. Protoc. 1: 1559-1582.
- VanGuilder HD, Vrana KE, Freeman WM (2008). «Twenty-five years of quantitative PCR for gene expression analysis». Biotechniques 44: 619–626.
- Salahuddin S.Z., Albashi D.V.,Markham P.D., et.al., (1986) Isolation of a new virus, HBLB, in patient with lymphoproliferative disorders. Science 234:596-601.
- Asano Y., Yoshikawa T., Kajita Y et al.(1992) Fatal encephalitis/encephalopathy in primary human herpesvirus-6 infection. Arch. Dis. Child. 67:1484-1485.
- Zhen Z, J Virol. 2005 Sep;79(18):11914-24.The human herpesvirus 6 G protein-coupled receptor homolog U51 positively regulates virus replication and enhances cell-cell fusion in vitro.
- Gautheret-Dejean, A J Virol Methods. 2002 Feb;100(1-2):27-35. Development of a real-time polymerase chain reaction assay for the diagnosis of human herpesvirus-6 infection and application to bone marrow transplant patients.
- Krueger GR, Ablashi DV, Josephs SF, Salahuddin SZ, Lembke U, Ramon A, Bertram G.Clinical indications and diagnostic techniques of human herpesvirus-6 (HHV-6) infection.n Vivo. 1991 May-Jun;5(3):287-95.
- Yamanishi K., Okuno T., Shiraki K., et al. (1988) Identification of human herpesvirus-6 as casual agent for exanthem subitum. Lancet 1:1065-1067.
- Preziozo P.J., Cangiarella J., Lee M., et al. (1992) Fatal disseminated infection with humanherpesvirus-6. J.Pediatrics 120:921-923.
Источник
Вирус герпеса 6 типа (ВГЧ-6, или HHV-6) – это ДНК-содержащие вирусные частицы, которые, как утверждает современная медицина, могут быть причиной развития рассеянного склероза, синдрома хронической усталости, иммунной депрессии, лимфопролиферативных болезней.
Учитывая это, возникают вполне уместные вопросы: как узнать о наличии вирусных частиц в организме? Какие для этого необходимо сдать анализы? Что делать, если результаты исследований в крови был выявлен вирус 6 типа герпеса? Ответы на эти вопросы рассмотрены в данной статье.
Немного о вирусе герпеса 6 типа и путях передачи
Герпес человека 6-го типа (human herpes virus 6) – это инфекция, вызванная вирусными частицами, которую открыли относительно недавно – в 1986 году, когда исследовали образцы клеточных структур ВИЧ-положительных пациентов.
Данный штамм вируса имеет 2 подштамма: А, В. Именно вирус герпеса 6 штамма является причиной развития у детей недуга – внезапной экзантемы (детской розеолы), которая приводит к гипертермии (скачек температуры до 39-40 градусов) и появлению розовой сыпи.
До трехлетнего возраста вирусом герпеса 6 типа заражаются практически все малыши. Проявляться эта вирусная инфекция может в виде лихорадки, поражений ЦНС (спинного и головного мозга): судороги, неврологические расстройства и др.
В ходе научных исследований было выявлено, что 60-90% людей заражены этим штаммом вируса. У многих из них за определенное время уже выработался приобретенный иммунитет – антитела, которые не дают вирусной инфекции проявлять себя.
Однако, это не значит, что дремлющая в организме вирусная инфекция никогда не даст о себе знать. При благоприятных условиях, а именно:
- сбой функционирования иммунной системы;
- переохлаждение;
- наличие хронических болезней;
- операционные вмешательства, особенно по трансплантации органов, когда врачи прописывают иммуноугнетающие препараты (чтобы исключить отторжение);
вирус герпеса 6 типа может активироваться и привести к развитию заболеваний, перечисленных выше. Помимо этого, инфицированный человек остается источником ношения и распространения вирусных частиц среди других людей.
Герпетическая инфекция штамм 6 может передаваться следующими способами:
- воздушно-капельным путем;
- с человеческой слюной;
- от матери к ребенку во время вынашивания плода.
При первичном инфицировании HHV-6 у человека на фоне сбоя функционирования иммунитета может развиться:
- сыпь;
- гипертермия – повышение температуры выше 38 градусов;
- лихорадка, судорожное подергивание мышц;
- цитопения – дефицит некоторых кровяных клеток.
В более тяжелых случаях на фоне герпетической инфекции может развиться гепатит (поражение печени), пневмония (воспаление легких) и даже энцефалит (воспаление оболочек головного мозга).
Анализ на герпес 6 типа
Согласно исследованиям ученых, вирус герпеса 6 типа на фоне сниженного иммунитета и наряду с другими инфекциями может спровоцировать развитие таких заболеваний как:
- лейкемия – рак крови;
- саркома – крайне тяжелая форма рака;
- рак шейки матки у женщин;>
- лимфоме – онкологическому заболеванию лимфатической системы;
- опухолям в головном мозге.
Исходя из этого, дабы уберечь себя и своих близких, важно своевременно выявить вирус герпеса 6 типа и предпринять меры по укреплению иммунной системы, здоровья в целом.
Для выявления вируса герпеса 6 и других типов, врачи используют следующие методы лабораторной диагностики:
- иммуноферментный анализ (ИФА) – анализ крови на антитела к герпесвирусу человека 6 типа IgG (или anti hhv 6 типа igg);
- полимеразная цепная реакция (ПЦР герпес 6 типа), которая помогает выявить ДНК ВГЧ 6 типа.
Анализ крови на герпес 6 типа проводиться с целью обнаружения специфических иммунных белков – иммуноглобулинов (антител) по отношению к вирусной инфекции. Эти белковые соединения начинают активно образовываться на 7-й день после проникновения вирусных частиц в организм человека.
Через 14-20 дней количество антител становится максимальным, после чего они сохраняется в крови пожизненно. В крови ребенка также могут обнаруживаться указанные иммуноглобулины, которые попадают в кровь малыша с молоком матери во время грудного вскармливания.
Расшифровка данных иммуноферментного анализа
Проводить анализ ИФА стоит в специально подготовленных для этого лабораториях, которые имеют соответствующую лицензию. Однако, каждая лаборатория использует свои норматические значения, которые в большинстве случаев сильно не отличаются.
Эти значения указываются на бланке, а рядом с ними проставляются результаты обследования. Сравнивая 2 этих показателя, врач определяет наличие или отсутствие инфекции:
- human herpes virus 6 igg положительный свидетельствует о том, что антитела к герпесвирусу человека 6 типа обнаружены и они превышают допустимые нормы. Это говорит о наличии вирусных структур в организме и их реактивации.
- human herpes virus 6 igg отрицательный – это норма, свидетельствующая об отсутствии этого вида инфекции или пребывании ее в состоянии анабиоза (сниженной жизнедеятельности), что не угрожает нормальному функционированию организма.
Однако, даже если anti hhv 6 типа igg положительный, этот результат анализов не должен ввергать больного в панику, так как своевременно назначенная врачом противовирусная терапия поможет деактивировать жизнедеятельность вирусных частиц и их влияние на организм.
ПЦР-диагностика human herpesvirus hhv 6 кач. ДНК
Вирусная ДНК – это нуклеиновая кислота, в которой закодирована вся наследственная информация о данном типе вируса. С помощью ПЦР диагностики можно добиться многократного увеличения концентраций нуклеиновых кислоты ДНК или РНК и выявить именно ДНК вируса герпеса 6 типа.
Производится данная реакция путем многочисленного копирования генетической информации с помощью специальных ферментов (биокатализаторов, ускоряющих реакцию).
Данный вид диагностики очень эффективен, так как некоторые виды лейкоцитов – лимфоциты и моноциты крови являются клеточными структурами, где обитает и самопроизводится вирус герпеса 6 типа, и с помощью исследований сыворотки или плазмы крови его можно обнаружить.
Для ПЦР-диагностики герпесвирусов 6 типа кач ДНК (качественного анализа) чаще всего берется кровь из вены или слюна пациента. Метод ПЦР очень точен и дает возможность выявить даже ничтожно малые дозы вирусных частиц в организме.
Результаты ПЦР-диагностики, как и при иммуноферментном анализе, бывают положительными, которые свидетельствуют о наличии инфекции, или отрицательными, что говорит о ее отсутствии.
Подготовка к сдаче ИФА и ПЦР-диагностике
Специальной подготовки к сдаче этих двух анализов не требуется, лишь накануне перед сдачей ИФА и ПЦР-диагностикой следует избегать чрезмерного употребления жирной еды. Кровь для этих анализов нужно сдавать натощак.
Вышеперечисленные анализы помогают определить:
- подтвердить наличие или отсутствие в организме вирусной инфекции;
- какой именно характер течения имеет вирусная инфекция: активный или неактивный;
- используются для дифференциальной диагностики герпетических инфекций.
Однако, главное, что нужно помнить: практически любая вирусная инфекция не сможет противостоять крепкому иммунитету, поэтому главные усилия необходимо направлять на улучшение работы иммунной системы.
Полезное видео
Источник
Вирус герпеса человека 6 типа (ВГЧ-6) – ДНК–содержащий вирус семейства Herpesviridae подсемейства Betaherpesvirinae рода Roseolavirus. ВГЧ-6 был впервые выделен в 1986 г. из В-лимфоцитов периферической крови больных неходжкинскими лимфомами, которые возникают у больных ВИЧ-инфекцией. Вирус относится к подсемейству бета-герпес-вирусов, является ближайшим генетическим родственником ЦМВ, выделяют два варианта: ВГЧ-6А и ВГЧ-6В.
Репликация вируса в мононуклеарах периферической крови происходит относительно медленно и сопровождается лизисом клетки-хозяина. Для ВГЧ-6, как и для других герпес-вирусов, характерна способность к персистенции и латенции в организме инфицированного человека. Вирус проявляет тропизм к широкому спектру клеток хозяина: его обнаруживали в лимфатических узлах, лимфоцитах периферической крови, моноцитах, макрофагах, клетках почек, в слюнных железах, мозге. В момент острой инфекции возбудитель может быть выделен из крови. После заражения ВГЧ-6-инфекция приобретает латентное течение. Место латентного содержания вируса не изучено, предполагают, что вирус остается латентным на некоторое время в моноцитах и макрофагах. Вирус инфицирует слюнные железы и выделяется из них. Обнаружение вируса в крови характерно лишь во время фебрильной стадии внезапной экзантемы и, вероятно, при реактивации вируса и генерализации инфекции в условиях иммуносупрессии. Патогенез реактивации инфекции не ясен.
Инфекция ВГЧ-6 – антропоноз. Источник инфекции – человек, страдающий манифестной или латентной формой инфекции, а также вирусоносители. Пути передачи инфекции – воздушно-капельный, контактно-бытовой, парентеральный, трансплацентарный. Факторы передачи – слюна, мокрота, кровь. Инфекция отличается всеобщей восприимчивостью.
Показана высокая патогенетическая значимость ВГЧ-6: он может вызывать острые поражения кожи у детей раннего возраста (внезапная экзантема новорожденных), лихорадку новорожденных с судорожным синдромом, синдром хронической усталости (в то же время последние работы придают большее значение в развитии данной патологии ВГЧ-7), мононуклеозоподобный синдром; у иммунокомпрометированных лиц – быть причиной лихорадки, пневмонии, гепатита, поражения ЦНС. Доказано, что вирус может выступать и в качестве кофактора ВИЧ. Наряду с возникновением первичной инфекции, возможна реактивация вируса: у детей, внутриутробно инфицированных ВИЧ-1, первичная ВГЧ-6-инфекция способствовала более быстрому развитию клинических проявлений уже в течение первого года жизни ребенка. Наличие активной ВГЧ-6 инфекции у ВИЧ-инфицированного ребенка, возможно, приводит к более быстрой прогрессии основного заболевания в течение 1-го года жизни. Описаны случаи пневмонии, энцефалита ВГЧ-6 этиологии у больных ВИЧ-инфекцией. ДНК ВГЧ-6 определяли в тканях головного мозга у погибших больных на стадии СПИДа. У больных ВИЧ-инфекцией при выраженной иммуносупрессии возможно поражение ВГЧ-6 ЦНС, легких и других органов, однако клиническая характеристика поражения отдельных органов, диагностическая чувствительность и специфичность различных лабораторных маркеров точно не охарактеризованы.
Верификация диагноза ВГЧ-6 инфекции осуществляется только при положительных результатах лабораторных исследований.
Дифференциальная диагностика. Энтеро- и аденовирусная инфекция, корь, краснуха, скарлатина, пневмония, средний отит, острый пиелонефрит, менингит, пневмококковая бактериемия, аллергические высыпания.
Показания к обследованию
- Пятнисто-папулезная сыпь (экзантема) в сочетании с лимфаденопатией после непродолжительной лихорадки;
- увеличение затылочных, заднешейных и/или околоушных лимфатических узлов;
- исследование после контакта с больным внезапной экзантемой или другой инфекцией, вызванной ВГЧ-6 или с подозрением на данные нозологические формы;
- дифференциальная диагностика экзантемных заболеваний;
- иммунодефицитные состояния;
- хроническая усталость и снижение работоспособности более чем на 50% с длительностью около 6 месяцев при отсутствии других заболеваний, вызывающих аналогичные признаки;
- симптоматика врожденной инфекции, пороки развития у новорожденных.
Этиологическая лабораторная диагностика включает выявление возбудителя в культуре клеток, обнаружение ДНК вируса, определение специфических АТ IgM, IgG к антигенам ВГЧ-6.
Материал для исследования
- Плазма крови, СМЖ, лейкоцитарная фракция крови, слюна – выделение ДНК, выявление возбудителя в культуре клеток;
- сыворотка крови – определение АТ.
Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Выявление возбудителя в культуре клеток в настоящее время для рутинной диагностики инфекции, вызываемой вирусом ВГЧ-6, не применяются ввиду трудоемкости, длительности исполнения и необходимости определенных условий проведения исследований.
Основным методом дифференциальной диагностики инфекции является детектирование и определение концентрации ДНК ВГЧ-6 методом ПЦР. При исследовании цельной крови для диагностики инфекции предпочтительно количественное определение ДНК, которое позволит дифференцировать латентную и активную инфекцию, поскольку вирус может присутствовать в лейкоцитах здоровых лиц. Обнаружение ДНК вируса в плазме крови, но не в цельной крови подтверждает наличие активной инфекции. Результаты определения ДНК ВГЧ-6 в количественном формате позволяют провести динамическое наблюдение: на основании увеличения концентрации в периферической крови, лейкоцитах, СМЖ, слюне установить активность инфекционного процесса, выявить реактивацию, оценить эффективность проводимой терапии.
Для выявления специфических АТ IgM, IgG к АГ ВГЧ-6 используют преимущественно ИФА. Определение АТ IgG может быть выполнено в качественном и количественном формате. Обнаружение АТ IgM позволяет установить диагноз текущей первичной ВГЧ-6-инфекции, результаты определения АТ IgG в количественном формате – провести динамическое наблюдение, оценить состояние постинфекционного иммунитета к ВГЧ-6.
Показания к применению различных лабораторных исследований (герпес 6 типа – анализ). Индикаторами активной инфекции служат наличие ДНК ВГЧ-6 и АТ IgM. АТ IgM появляются в крови на 4–7 сутки от начала болезни и сохраняются в течение нескольких месяцев. АТ IgG появляются в крови на 7–10 сутки болезни и сохраняются в течение всей жизни, поэтому для установления факта первичного инфицирования необходимо количественное определение АТ IgG в динамике. Определение вирусоспецифических АТ IgG может быть использовано в скрининговых исследованиях для определения наличия иммунитета к ВГЧ-6.
Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Выявление специфического фрагмента ДНК ВГЧ-6 в образцах биоматериала пациента (плазма крови, СМЖ, соскобы со слизистой оболочки ротоглотки) позволяет при однократном тестировании подтвердить факт инфицирования ВГЧ 6 типа.
Обнаружение специфических АТ IgМ, маркеров острой фазы заболевания, свидетельствует о первичном инфицировании или реактивации инфекции. Однократное обнаружение АТ IgG не является однозначным свидетельством первичной инфекции.
Источник
