Вирус герпеса 6 типа метод пцр

У 15% детей раннего возраста, поступающих на стационарное лечение, протекает инфекция, вызванная вирусом герпеса шестого типа.

Так как вирусная инфекция, а именно розеола, шестая болезнь или внезапная детская экзантема, осложняется судорогами, своевременный анализ на герпес 6 типа становится важным с точки зрения предупреждения последующих осложнений.

Полноценные терапевтические мероприятия позволяют предотвратить повтор судорог, а также энцефалит.

Вирус считается одним из провоцирующих факторов синдрома хронической усталости, поэтому анализ крови на герпес 6 типа актуален и для диагностики расстройств функций высшей нервной деятельности у взрослых, а также в комплексном выявлении причины гепатита, миокардита, тромбоцитопенической пурпуры, эозинофилии, синдрома гиперчувствительности к медицинским препаратам.

Где можно обнаружить вирус герпеса 6 типа

фото розеола у ребенка

Детская внезапная экзантема или розеола, инициированная герпесом 6 типа, повсеместно и широко распространена среди младенцев и детей раннего возраста.

Актуальность инфекции обусловлена отсутствием стандартных решений лечения, тяжестью осложнений. Кроме того, клиника розеолы на начальных этапах заболевания не имеет четких специфических симптомов, а патогномоничный признак – сыпь на фоне снижения высокой температуры – появляется в конце заболевания, когда диагностика не совсем актуальна.

Розеола является проявлением первичного заражения вирусом герпеса 6 типа и максимально проявляется в раннем детстве. Помимо классического течения в виде стойкой лихорадки и высыпаний, внезапная экзантема способна протекать практически бессимптомно.

Важно!

Как и другие виды герпеса, шестой тип после первичного инфицирования и заболевания вступает в фазу латенции (бессимптомного носительства) и пожизненно сохраняется в организме человека.

Повторная активация вируса чаще характерна для лиц с иммунодефицитом и выражается в форме пневмонии, гепатита, воспаления сердечной мышцы, энцефалита, отторжении пересаженного органа или ткани.

Следует отметить, что ДНК вируса герпеса 6 типа имеет структурное сходство с третьим типом (цитомегаловирусом), поэтому их относят к одной подгруппе бета. Шестой вирус делится на 2 подтипа: А и В.

Последний вызывает розеолу, воспаление головного мозга и судорожный синдром фебрильного типа, чем и опасен для маленьких детей. В свою очередь, подтип А обуславливает синдром хронической усталости, иммунодефицит, прогрессирование ВИЧ, рассеянный склероз.

Носительство герпеса 6 типа регистрируется у 90% населения планеты, что обусловлено легкостью его передачи между людьми посредством слюны.

Но при этом результат анализа на 6 тип герпеса в слюне может быть ложноположительным, так как перекрестно реагирует с ВГЧ 7 разновидности.

Помимо слюны, резервуаром возбудителя служат и небные миндалины. ДНК ВГЧ 6 типа пожизненно находится в моноцитах крови.

Большинство женщин в стадии максимальной фертильности инфицированы вирусом, поэтому некоторые из них могут стать источником инфекции для развивающегося в утробе ребенка.

У 2% беременных вирус обнаруживается в отделяемом влагалища, а у 40% — определяется ДНК в крови.

При выкидыше, гепатитах новорожденного, гидроцефалии у плода вирус герпеса 6 типа подозревают как потенциальную причину.

Внутриутробное инфицирование данным патогеном встречается с частотой не более 1% в популяции.

Более 90% случаев розеолы отмечается в возрасте до 2 лет. При этом максимальные уровни регистрируют от 7 до 14 месяцев.

Ребенок при рождении имеет определенный уровень anti HHV 6 типа IgG, но к 4 месяцу жизни уровень иммуноглобулинов падает, и младенец становится все более уязвим к инфекции.

Клиническая диагностика розеолы

фото розеола у детей

Заболевание у детей подозревают при следующих характерных признаках:

• высокая температура тела (поднимается резко), которая удерживается 4-5 дней на значениях 39-40°С и выше, эффект от жаропонижающих несущественный;
• на фоне температуры могут не отмечаться такие симптомы, как заложенность носа, кашель, но присутствует покраснение горла (входные ворота для инфекции);
• у маленьких детей обычно сохраняются аппетит и активность, несмотря на высокую температуру;
• при снижении температуры на коже появляется сыпь в форме папул и пятен красного или розового цвета, не сливающихся между собой, покрывающих в начале только туловище, а затем шею, лицо, руки и ноги. Также могут встречаться и мелкие пузырьки. Проходит сыпь за 1-3 дня самостоятельно;
• для герпеса 6 типа характерно появление судорожного синдрома на фоне высокой температуры в начале заболевания.

Зачастую ребенку на при высокой температуре выставляют диагноз «ОРВИ», не предлагая сдать анализ крови на вирус герпеса 6 типа. Знать вид инфекции важно в том случае, когда при лихорадке появились судороги.

Это необходимо для исключения постановки «лишних» неврологических диагнозов ребенку, а также проявления настороженности на ближайшие дни заболевания.

Если судороги повторяются, возрастает вероятность эпилепсии, поэтому терапия должна быть направлена на профилактику их повторения.

Помимо традиционного течения болезни, достаточно часто регистрируются случаи температуры без сыпи.

Анализы на ВГЧ 6 типа и расшифровка

После оценки симптоматики у больного приступают к лабораторной диагностике вирусной инфекции. Для верификации диагноза используют анализы:

• серологическая диагностика — кровь на антитела к герпесвирусу человека 6 типа IgG и IgМ;
• ПЦР на герпес 6 типа в слюне, крови и другом материале;
• общий клинический анализ крови.

Анализ крови на антитела

Для выявления иммуноглобулинов к ВГЧ 6 типа сдают кровь из вены с целью выполнения ИФА.

Важно!

Определить антитела IgМ (маркеры острой первичной инфекции) можно на 5-7 день заболевания.

Максимальный уровень иммуноглобулинов М отмечается на 2-3 неделе болезни. Через 2 месяца эти антитела не обнаруживаются в анализе крови. Антитела М к герпесвирусу человека 6 типа не будут обнаружены при реактивации инфекционного процесса. Данный факт отличает данную вирусную инфекцию от многих заболеваний.

Анализ на Human herpes virus 6 IgG положительный становится на 7-11 день болезни с максимумом на третьей неделе. В отличие от IgМ сохраняются IgG всю жизнь.

Следует иметь в виду, что, начиная с 2 лет 90% людей будут иметь положительный анализ на ВГЧ 6 типа, поэтому для диагностики заболевания в данный момент времени необходимо сдавать кровь 2 раза с интервалом в 14 дней (на основании первого положительного результата диагноз не выставляют).

Anti HHV 6 типа IgG положительные при остром процессе у ранее инфицированного индивидуума будут при первой сдаче крови, а во втором результате количество антител возрастет. Если первый анализ отрицательный, то второй при этой инфекции станет положительным.

Если пациент проходит диагностику синдрома хронической усталости или иных болезней и анализ на Human Herpes virus 6 IgG положительный, следует провести дифференциацию подтипов А и В с помощью моноклональных и поликлональных антител.

ПЦР

Определение генетического материала вируса в слюне, крови и других биологических жидкостях проводится с помощью ПЦР.

Этот анализ подразумевает качественную и количественную диагностику. В первом случае определяют наличие ДНК, во втором – число копий вирусной частицы (вирусную нагрузку).

Если анализ на ДНК Human herpesvirus 6 (HHV 6) по качественным показателям положительный – диагноз подтвержден, что означает присутствие в материале вируса. Но данный результат может подтверждать, как бессимптомное носительство, так и заболевание.

Количественное определение ДНК необходимо для анализа эффективности выполняемого лечения.

Общий анализ крови

Для внезапной детской экзантемы или розеолы у детей характерны некоторые изменения в крови: снижение уровня лейкоцитов на пике заболевания, снижение количества нейтрофилов, тромбоцитов, а также в некоторых случаях небольшое количество атипичных мононуклеаров (не более 10%).

Если клиника инфекции типичная, но анализы не показывают наличия ВГЧ 6 типа, проводят исследования на предмет вируса герпеса 7 типа, энтеровируса. Сыпь довольно часто путают с краснушной или аллергической, что ведет к ложным результатам.

Автор: врач-инфекционист Куликовская Наталья Александровна

Полезное видео

Комплексное исследование, направленное на обнаружение генетического материала (ДНК) цитомегаловируса, вирус Эпштейна – Барр, вируса герпеса человека 6-го типа методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени.

Синонимы русские

Цитомегаловирус; ЦМВ; вирус Эпштейна – Барр; ЭБВ; герпес-вирус 6-го типа; ВГЧ-6; ДНК [полимеразная цепная реакция в режиме реального времени]; количественный анализ.

Синонимы английские

Cytomegalovirus; CMV; Epstein Barr-Virus; EBV; Human Herpes Virus 6; HHV-6; DNA [polymerase chain reaction, real-time PCR]; quantitative; qRT-PCR.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Ликвор, мазок из зева (ротоглотки), слюна, биоптат (биоптат лёгких, печени, ЖКТ), венозная кровь.

Общая информация об исследовании

Цитомегаловирус, вирус Эпштейна – Барр, вирус герпеса человека 6-го типа являются представителями семейства герпес-вирусов. Они обладают высокой патогенностью для человека, имеют способность к длительному латентному существованию, к персистенции в организме человека и могут вызывать заболевания с различными клиническими проявлениями.

Цитомегаловирус (Cytomegalovirus) относится к семейству герпес-вирусов человека, рода Cytomegalovirus и является возбудителем цитомегаловирусной инфекции. Цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ) – это широко распространенная инфекция человека, характеризующаяся легким, бессимптомным течением у людей в обычных условиях и с нормально функционирующей иммунной системой. Особое клиническое значение она приобретает у лиц с патологией иммунной системы, иммунодефицитными состояниями и у беременных женщин из-за риска внутриутробного инфицирования плода.

Цитомегаловирус является ДНК-содержащим вирусом, обладающим способностью к медленному распространению в культуре инфицированных клеток и приводящим к их изменению и увеличению размера (цитомегалии). Источником инфекции является человек, выделяющий вирус через различные биологические жидкости. К ним относятся кровь, слюна, моча, грудное молоко, цервикальный и вагинальный секрет, семенная жидкость, ликвор, содержимое желудочно-кишечного тракта и прочие секреты. Инфекция передается воздушно-капельным, контактным, половым путем, в результате переливания крови от инфицированного донора. Возможно также заражение при трансплантации органов и вертикальный путь передачи, от инфицированной женщины к ребенку во время беременности или родов. Длительность инкубационного периода заболевания часто установить невозможно, так как большинство клинических случаев не распознается и протекает в латентной, бессимптомной, форме.

Различают приобретенную и врождённую формы ЦМВИ. Приобретенная форма инфекции протекает в виде острого локализованного процесса, схожего по клинической симптоматике с острой респираторной вирусной инфекцией или инфекционным мононуклеозом. Отмечается повышение температуры тела, слабость, общее недомогание, боль в горле, миалгия, увеличение шейных лимфатических узлов. В редких случаях отмечаются осложнения в виде артралгий, артритов, пневмонии, цитомегаловирусного гепатита. У детей до трех месяцев жизни, а также у лиц с патологией иммунной системы (иммунодефицитными состояниями, ВИЧ-инфекцией, после трансплантации органов, лечения иммуносупрессивными препаратами, при злокачественных заболеваниях) ЦМВИ может протекать в тяжелой форме с развитием серьезных осложнений. При этом развиваются тяжелые поражения легких, почек, печени, желудочно-кишечного тракта, нервной системы с развитием вирусного энцефалита. Врождённая форма ЦМВИ возникает в результате трансплацентарной передачи инфекции от матери плоду при инфицировании женщины на ранних сроках беременности, особенно при первичном инфицировании. Развивается острая врождённая ЦМВИ, приводящая к самопроизвольному аборту или гибели эмбриона. При поражении плода на более поздних сроках беременности развивается геморрагический синдром с кровоизлияниями в кожу, внутренние органы, отмечается поражение нервной системы.

Вирус Эпштейна – Барр (EBV) относится к семейству герпес-вирусов (Herpesviridae) человека 4-й группы. Он представляет собой ДНК-содержащий лимфопролиферативный вирус. Его основной особенностью является способность реплицироваться преимущественно в В-лимфоцитах без последующего разрушения клеток.Помимо этого, вирус может инфицировать Т-лимфоциты и эпителиальные клетки.

Источником инфекции является больной человек или вирусоноситель. Путь передачи вируса – преимущественно воздушно-капельный. У 90-95 % населения некоторых стран выявляются антитела к антигенам вируса, что свидетельствует о предшествующем инфицировании вирусом. Острая инфекция обычно протекает бессимптомно у детей с нормально функционирующей иммунной системой, клинически проявляясь в виде инфекционного мононуклеоза у 30-50 % иммунокомпетентных подростков и взрослых. При патологиях иммунной системы, иммунодефицитных состояниях, при применении иммуносупрессивных препаратов возможно развитие разнообразных патологических процессов и заболеваний, вызванных вирусом Эпштейна – Барр. У таких больных присутствие вируса ассоциировано с развитием различных лимфопролиферативных нарушений и некоторых онкологических процессов, включающих лимфому Беркитта, назофарингеальную карциному, лимфогранулематоз (болезнь Ходжкина), В-клеточную лимфому. Также вирус обнаруживается у пациентов при некоторых аутоиммунных заболеваниях, синдроме хронической усталости.

Инфекционный мононуклеоз – это острое вирусное заболевание, причиной которого является вирус Эпштейна – Барр. В основном заболевание регистрируется у детей и лиц молодого возраста до 35 лет. Инкубационный период заболевания составляет в среднем 5-14 дней, иногда до 30 дней. К клиническим проявлениям заболевания относятся лихорадка, головная боль, поражение зева, нёбных, глоточных миндалин, лимфатических узлов (лимфоаденопатия), увеличение печени и селезенки. Заболевание может протекать в легкой, средней тяжести и тяжелой форме. К осложнениям инфекционного мононуклеоза относятся отиты, синуситы, паратонзиллиты, пневмонии, гепатиты. Редко могут встречаться разрывы селезенки, острая печеночная недостаточность, острая гемолитическая анемия, тромбоцитопения, миокардит, неврит, менингит, менингоэнцефалит. В редких случаях развивается хроническая активная инфекция, при которой симптомы заболевания сохраняются на протяжении более чем 6 месяцев после первичного инфицирования вирусом Эпштейна – Барр.

Вирус герпеса человека типа 6 (ВГЧ-6) представляет собой ДНК-содержащий вирус, относящийся к семейству герпес-вирусов человека. Он способен к репликации в Т-лимфоцитах, но может быть обнаружен в В-лимфоцитах, моноцитах, эндотелиальных клетках, гепатоцитах и ряде других. Источником инфекции является больной человек или вирусоноситель. Путь передачи вируса преимущественно воздушно-капельный. Возможна передача вируса вертикальным путем от матери к плоду во время беременности, при гемотрансфузиях, во время операций и при трансплантации органов.

Вирус способен проникать в лимфатическую систему и вызывать заболевания с разнообразной клинической симптоматикой. Чаще всего патологический процесс, вызванный ВГЧ-6, развивается у лиц с патологией иммунной системы, иммунодефицитными состояниями, в частности при ВИЧ-инфекции, при применении иммуносупрессивной терапии, после трансплантации органов, при аутоиммунных заболеваниях.

В большинстве случаев инфекция, вызванная ВГЧ-6, протекает бессимптомно. К основным клиническим проявлениям относятся лихорадка, экзантема в виде эритематозных пятен или пятнисто-папулезной сыпи. В некоторых случаях возможно развитие осложнений со стороны центральной нервной системы: судороги, энцефалит, менингоэнцефалит, серозный менингит. У иммунокопрометированных лиц инфекция характеризуется тяжелым течением, генерализацией процесса. Развиваются лимфаденопатии, пневмония, гепатит, энцефалит.

Диагностика вирусной инфекции, вызванной представленными вирусами, является комплексной и основана на оценке клинических проявлений заболеваний и лабораторных методов диагностики. Современные методы лабораторной диагностики играют важную роль в диагностики герпес-вирусных инфекций, особенно на ранних стадиях инфекционного процесса. К таким методам относится метод полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять генетический материал возбудителя на ранних этапах заболевания. Он характеризуется высокими показателями диагностической чувствительности и специфичности, быстротой получения конечного результата и доступностью. Особенностью метода является возможность выявлять ДНК (дезоксирибонуклеиновую кислоту) вируса даже при малом содержании её в исследуемом биологическом материале. Метод основан на многократном увеличении числа копий специфичного для данного возбудителя участка ДНК. Для диагностики может использоваться разнообразный биологический материал, взятый у детей, взрослых лиц, людей с патологией иммунной системы, беременных женщин. Метод позволяет определять количество молекул ДНК исследуемого вируса, что является важным в диагностике острой формы инфекции, реактивации персистентной инфекции, носительстве вируса, а также при контроле эффективности проводимой противовирусной терапии.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики и подтверждения инфекционного процесса, вызванного цитомегаловирусом, вирусом Эпштейна – Барр, вирусом герпеса человека 6-го типа.
• Для диагностики острой или текущей вирусной инфекции.
• Для диагностики первичной инфекции и/или активной формы инфекции в период реактивации (обострения) персистентной инфекции.
• Для дифференциальной диагностики инфекций, вызванных герпес-вирусами.
• Для дифференциальной диагностики инфекций, протекающих с развитием ангин, тонзиллитов, высыпаниями, лихорадкой.

Когда назначается исследование?

• При диагностике и дифференциальной диагностике инфекций, вызванных герпес-вирусами.
• При клинических проявлениях заболеваний, вызванных цитомегаловирусом, вирусом Эпштейна – Барр, вирусом герпеса человека 6-го типа, или при их бессимптомном, латентном течении.
• При обследовании женщин, планирующих беременность, и женщин при патологиях имеющейся беременности.
• При комплексном обследовании пациентов с лимфопролиферативными заболеваниями и гемобластозами.
• При обследовании реципиентов органов и тканей до и после трансплантации, при проведении иммуносупрессивной терапии.
• При диагностике вирус-ассоциированных заболеваний у ВИЧ-инфицированных и при других иммунодефицитных состояниях.
• При контроле за эффективностью проведенного лечения противовирусными препаратами.

Что означают результаты?

Референсные значения

ДНК CMV концентрация: не обнаружено.

ДНК EBV концентрация: не обнаружено.

ДНК HHV6 концентрация: не обнаружено.

* При положительном результате показатель выдается в копиях на миллилитр (копий/мл).

Причины положительного результата:

• Инфицирование цитомегаловирусом или носительство вируса.
• Инфицирование вирусом Эпштейна – Барр или носительство вируса.
• Инфицирование вирусом герпеса человека 6-го типа или носительство вируса.

Причины отрицательного результата:

• Отсутствие инфицирования цитомегаловирусом;
• Отсутствие инфицирования вирусом Эпштейна – Барр;
• Отсутствие инфицирования вирусом герпеса человека 6-го типа.



Также рекомендуется

• Cytomegalovirus, ДНК, количественно [реал-тайм ПЦР]
• Epstein Barr Virus, ДНК [реал-тайм ПЦР]
• Human Herpes Virus 6, ДНК [реал-тайм ПЦР]
• Cytomegalovirus предранний белок IEA, IgM, IgG
• Cytomegalovirus, IgG
• Cytomegalovirus, IgM
• Cytomegalovirus, ДНК [реал-тайм ПЦР]
• Антитела к Cytomegalovirus (IgG) с определением авидности
• Human Herpes Virus 6, IgG
• Epstein Barr Virus капсидный белок (VCA), IgM
• Epstein Barr Virus ранние антигены (EA), IgG
• Epstein Barr Virus ядерныйантиген (EBNA), IgG (количественно)
• Epstein Barr Virus капсидный белок (VCA), IgG
• Лабораторная диагностика инфекционного мононуклеоза
• Определение авидности иммуноглобулинов класса IgG к капсидному антигену (VCA) вируса Эпштейна – Барр

Кто назначает исследование?

Терапевт, врач общей практики, инфекционист, аллерголог-иммунолог, акушер-гинеколог, неонатолог, педиатр, уролог, оториноларинголог, гематолог, невропатолог, хирург, онколог.

Литература

• Fauci, Braunwald, Kasper, Hauser, Longo, Jameson, Loscalzo Harrison’s principles of internal medicine, 17th edition, 2009.
• Покровский В.И., Творогова М.Г., Шипулин Г.А. Лабораторная диагностика инфекционных болезней. Справочник / М. : БИНОМ. – 2013.
• Шувалова Е.П. Инфекционные болезни / М.: Медицина. – 2005. – 696 с.
• Wang L, Xu X, Zhang H, Qian J, Zhu J. Dried blood spots PCR assays to screen congenital cytomegalovirus infection: a meta-analysis / Virol J. 2015 Apr 14;12:60.
• VanGuilder HD, Vrana KE, Freeman WM (2008). «Twenty-five years of quantitative PCR for gene expression analysis». Biotechniques 44: 619–626.